利用酵母展示技术和深度测序技术，对GPCR配体C5a进行高通量突变特性分析

提出了一种基于脂质体的新筛选技术，用于稳定并研究GPCR配体的结合特性，首次发现选择性激活C5aR2的新型配体，揭示了C5aR1和C5aR2在结合机制上的差异。

　　

亮点

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开发了一种新的筛选技术，用于分析靶向G蛋白偶联受体（GPCRs）的配体的结合特性

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通过位点饱和突变实验研究了C5a与C5aR1和C5aR2的结合机制

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突变实验揭示了C5a在C5aR1和C5aR2上的结合机制存在差异

总结

高通量突变技术被广泛用于系统性地研究蛋白质功能，在治疗药物开发中发挥着关键作用。作为最大的膜受体类别，G蛋白偶联受体（GPCRs）是这些研究的主要对象。然而，尽管在理解GPCRs本身方面取得了显著进展，但由于目标受体的溶解难度较大，对其配体的突变研究进展相对滞后。在这项研究中，我们提出了一种新方法，利用脂质囊泡将目标膜受体嵌入并稳定其中，从而实现直接配体筛选。我们应用这一平台研究了过敏毒素补体5a（C5a），并探讨了突变如何影响其与两种天然GPCRs（补体5a受体1（C5aR1）和补体5a受体2（C5aR2）的结合。该筛选为这种相互作用的分子机制提供了新的见解，并发现了一些新型配体，这些配体能够选择性激活C5aR2，而不会激活C5aR1。

图形摘要