一种新型高度相似杂质（属于乌布罗格潘类化合物）的鉴定、分离、结构表征及色谱分离方法

《Current Analytical Chemistry》：Identification, Isolation, Structure Characterization, and Chromatographic Separation of a New Highly Analogous Impurity of the Ubrogepant

本研究通过优化HPLC-UV色谱法结合NMR和LC-MS技术，成功分离并鉴定了乌布替坦碱水解产生的差向异构体杂质，建立检测限低至0.2 μg/mL的分析方法。

　　

摘要

背景：Ubrogepant是一种受监管的肽类受体拮抗剂，与降钙素基因相关，已在美国获得批准用于特异性治疗偏头痛。

目的：在药物剂型的碱水解过程中发现的一种杂质其结构与Ubrogepant非常相似。本研究旨在利用核磁共振（NMR）和液相色谱-质谱（LC-MS）技术对该类似杂质进行表征。此外，开发一种极其灵敏且分辨率极高的分析方法以识别和测定药品中类似杂质的含量至关重要。

方法：采用优化的色谱方法（基于反相高效液相色谱（reverse-phase HPLC）和紫外检测技术）鉴定出该杂质。该方法使用了一种带有电荷表面的混合柱（CSH column），并在梯度洗脱模式下进行操作。洗脱液由A通道（0.1%三氟乙酸）和B通道（乙腈与水，体积比80:20%）组成。通过分段收集将类似杂质分离出来，随后通过快速色谱法进行纯化，并利用NMR（一维和二维）及LC-MS对其进行表征。

结果：该类似杂质能够从Ubrogepant峰中成功分离出来，分离度高于2.0。在室温下经过30分钟碱处理后，该杂质的含量约为Ubrogepant峰的10%。通过NMR（1D 13C NMR和1H NMR、2D HMBC、HSQC、NOESY和COSY）及LC-MS分析确认，该杂质为Ubrogepant的异构体。所开发的方法具有极高的灵敏度，即使在浓度为0.2 μg/mL的情况下也能实现对该类似杂质的定量。

结论：该方法表现出极高的精确度、线性、特异性和准确性。由于这种新杂质与活性成分Ubrogepant的相似性显著，因此值得特别关注。

关键词： Ubrogepant, 异构体, LC-MS, NMR, NOESY, HPLC, 快速色谱法