通过激光诱导解离与质谱联用技术对葡萄球菌肠毒素进行定量分析

《Journal of the American Society for Mass Spectrometry》：Quantification of Staphylococcal Enterotoxins by Coupling Laser-Induced Dissociation and Mass Spectrometry

肠毒素精准检测新方法：激光诱导解离-质谱联用技术突破传统限制

　　

葡萄球菌肠毒素（SEs）是一类毒力因子，使得金黄色葡萄球菌成为食物中毒的主要原因。某种菌株产生的SEs数量可能与其毒力相关；然而，准确量化这些毒素仍然是一个重大挑战。这一困难主要源于两个因素：SEs在纳克级别就具有催吐作用，并且在细菌生长过程中会分泌到复杂的生物基质中，这通常需要先进行免疫亲和富集才能进行多谱质谱（MS）分析。本研究提出了一种创新方法，结合了激光诱导解离（LID）和质谱技术，能够在无需预先免疫富集的情况下检测和量化低丰度的SEs。为了提高基于光学特性的检测灵敏度，使用473纳米激光通过LID-MS/MS技术选择性裂解SEs中的发色团衍生半胱氨酸肽。首先在五种主要SEs的合成肽上验证了这种衍生策略的有效性，随后使用添加到生物基质中的纯化毒素优化了样品制备过程。通过将SE合成肽添加到不同浓度的基质中评估了该方法线的线性。最后，通过检测和量化由金黄色葡萄球菌菌株产生的内源性SEs来验证了整个分析流程的准确性。这种LID-MS/MS方法为复杂样品中葡萄球菌肠毒素的精确量化提供了一种有前景的替代方案。