在杂交杉‘中山杉’的遗传转化过程中，优化器官发生过程及抗生素筛选方法

《Plant Cell, Tissue and Organ Culture (PCTOC)》：Optimization of organogenesis and antibiotic screening in genetic transformation of Taxodium hybrid ‘zhongshanshan’

Taxodium hybrid ‘zhongshanshan’的遗传转化研究中，确定了适宜的生根培养基（IBA 0.4 mg·L?1 + NAA 0.3 mg·L?1）及抗生素筛选浓度（G418 70-90 mg·L?1 + Cef 400 mg·L?1），为建立高效稳定遗传转化体系奠定基础。

　　

摘要

Taxodium杂交品种‘zhongshanshan’具有耐水、耐盐、抗风和抗病特性，因此在生态保护和景观美化中得到广泛应用，满足了巨大的市场需求。然而，传统的育种方法往往需要较长的杂交和筛选过程。因此，为了促进遗传改良并加速新品种的培育，迫切需要建立一个高效且稳定的遗传转化系统。在本研究中，我们探索了适合其生根的培养基和激素条件，并首次在含有0.4 mg·L?1 IBA和0.3 mg·L?1 NAA的DCR培养基中实现了生根。我们使用愈伤组织作为材料，研究了抗生素（包括遗传霉素G418、潮霉素Hyg、卡那霉素Kan、头孢噻肟钠Cef和氨苄西林Amp）对其增殖和分化的影响。结果表明，卡那霉素Kan的浓度在50–75 mg·L?1时对愈伤组织的增殖和分化具有关键抑制作用；遗传霉素G418的适宜浓度为70 mg·L?1–90 mg·L?1，潮霉素Hyg的临界抑制浓度为15–20 mg·L?1；氨苄西林Amp的浓度在300–400 mg·L?1时对Taxodium杂交品种‘zhongshanshan’的愈伤组织生长没有抑制作用。随后，将愈伤组织与Agrobacterium共培养发现，70 mg·L?1 G418与400 mg·L?1 Cef的组合具有较好的抗菌效果，这可以被认为是适合进行遗传转化的选择浓度。对器官发生优化和抗生素筛选的研究将为建立稳定的遗传转化系统奠定基础。