丝胶蛋白作为Lucigenin化学发光反应的新共反应物:一种用于超灵敏检测丝胶蛋白和超氧化物歧化酶的新方法

【字体: 时间:2025年10月29日 来源:Analytical Chemistry 6.7

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  丝心蛋白作为新型高效核心试剂在碱性Lucigenin CL系统中实现43倍信号增强,支持对sericin(0.12 μM)和SOD(0.28 ng/mL)的高灵敏度检测,方法兼具环保性、普适性和经济性优势,并成功应用于化妆品和血清样本检测。

  
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化学发光(CL)检测方法常常受到核心试剂的限制,这些试剂需要同时具备强大的信号放大能力和生物相容性。在这里,我们首次发现丝胶蛋白(一种从丝绸中提取的天然蛋白质)在碱性条件下可以作为Lucigenin CL体系中的高效核心试剂。令人印象深刻的是,这种新的Lucigenin–丝胶蛋白CL体系产生的发光强度比传统的Lucigenin–过氧化氢体系高出约43倍。此外,机制研究表明,丝胶蛋白中的富电子官能团显著促进了超氧阴离子(O2•–)的生成,从而加速了Lucigenin的氧化过程,进而显著增强了CL信号。利用这一改进的体系,我们开发了一个双功能CL平台,能够超灵敏地检测丝胶蛋白(检测限LOD = 0.12 μM)和超氧化物歧化酶(SOD,LOD = 0.28 ng/mL),其线性检测范围分别为0.25至50 μM和0.5至60 ng/mL(后者基于CL淬灭现象)。该方法在简便性、分析速度、灵敏度、选择性和成本效益方面具有显著优势。此外,该方法成功检测到了化妆品中的丝胶蛋白以及人血清样本中的SOD。重要的是,这项工作代表了首个用于丝胶蛋白检测的化学发光方法。此外,该体系还表现出较高的可持续性和实用性,这一点通过AGREE(绿色度)和BAGI(蓝色度)评估工具得到了验证。同时,它为CL体系引入了一类新的基于蛋白质的核心试剂,拓展了(生物)分析检测的技术边界。

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