基于多重PCR技术的急性胆囊炎快速病原体检测方法，使用FilmArray BCID2检测面板

《Frontiers in Microbiology》：Multiplex PCR-based rapid pathogen identification in acute cholecystitis using the FilmArray BCID2 panel

本研究旨在评估FilmArray? BCID2面板在急性胆道感染中快速检测病原体的有效性。通过比较77例患者胆汁样本的常规培养与BCID2检测结果，发现该面板对单菌和多菌感染的检测率分别为70.6%和94.1%，总体准确性达92.2%。结果证实BCID2能有效缩短诊断时间，支持早期靶向治疗和抗生素合理使用。

　　急性胆道感染，包括急性胆囊炎和胆管炎，是胆囊和胆道的严重炎症性疾病，具有较高的发病率和死亡率。这类疾病的治疗如果延误或不恰当，不仅会恶化患者的临床结局，还可能促进抗菌药物耐药性的产生。因此，快速而准确地识别致病菌对于改善患者预后至关重要。本研究评估了一种名为FilmArray? Blood Culture Identification 2（BCID2）的多重PCR系统，用于从急性胆囊炎患者的胆汁样本中快速检测病原体。

在临床实践中，传统的胆汁培养方法需要大约5天才能获得结果，这导致在等待微生物学检测结果期间，医生通常依赖经验性广谱抗生素治疗。这种做法虽然可以迅速控制感染，但可能带来不必要的抗生素使用，从而加剧耐药菌的传播。因此，开发快速诊断技术以支持更精准的抗菌药物选择显得尤为重要。BCID2面板作为一种商业化多重PCR系统，不仅能够同时检测多种病原体，还能识别抗药性基因，显著缩短诊断时间。然而，目前尚无专门针对急性腹腔内感染或胆道感染的多重PCR检测面板，因此本研究旨在探索其在胆道感染中的应用潜力。

研究对象为77名因急性胆囊炎接受手术的患者，这些患者均来自东京大学医学中心。所有样本均在手术过程中或通过经皮胆囊穿刺获得，并按照标准流程进行处理。每份样本被均分为两份，一份用于传统培养和抗菌药物敏感性测试，另一份则直接用于BCID2面板检测。通过比较两种方法的结果，研究人员计算了阳性百分符合率（PPA）、阴性百分符合率（NPA）、阳性预测值（PPV）、阴性预测值（NPV）以及总体准确性。结果显示，BCID2面板在检测至少一种病原体方面表现出82.4%的PPA和100%的NPA，阳性预测值为100%，阴性预测值为91.5%，总体准确性达到92.2%。对于单菌感染，BCID2面板的检测率为70.6%，而对于多菌感染，其检测率则高达94.1%。此外，高细菌载量（>10^6 CFU/mL）的样本在检测率上显著优于低载量样本，尽管这一差异在统计学上并不显著。

研究发现，BCID2面板在检测高细菌载量样本时表现尤为突出，能够识别出91.7%的致病菌，而在低载量样本中的检测率为77.3%。这表明该系统在多种感染类型中均具有良好的适用性，特别是在多菌感染的情况下。同时，BCID2面板检测出的阳性样本中，患者年龄更大，且具有更高的 Charlson 合并症指数、白细胞计数和C反应蛋白（CRP）水平，提示该系统可能更适用于严重感染或炎症反应较强的患者群体。

本研究还指出，BCID2面板在检测某些病原体时存在一定的局限性。例如，有7例检测结果为阴性，但实际上通过传统培养发现了病原体。这些假阴性结果主要归因于某些细菌（如链球菌和肠球菌）的检测难度较高。此外，检测出10例假阳性结果，其中部分可能是由于样本污染或非活性细菌的DNA残留所致。尽管这些假阳性结果较为少见，但仍需引起重视，并结合传统培养方法进行验证。

与之前的Verigene系统相比，BCID2面板在检测能力上有所提升。Verigene系统在胆汁样本中的检测率仅为35.7%，而BCID2面板则在不同感染类型和细菌载量下表现出更高的敏感性和特异性。这一进步可能归因于多重PCR技术相较于微阵列杂交技术更适用于低细菌载量样本。此外，BCID2面板在检测ESBL产生菌方面表现优异，成功识别了两例产CTX-M基因的肠杆菌科细菌，这对临床抗菌药物的选择具有重要意义。

总体而言，BCID2面板在急性胆道感染的病原体检测中展现出较高的效率和准确性。其快速检测能力有助于实现早期靶向治疗，减少经验性抗生素的使用，从而有助于抗菌药物的合理使用。然而，该系统在某些特定病原体（如厌氧菌）的检测上仍存在不足，未来可能需要通过增加检测范围或结合其他先进技术（如宏基因组分析）来进一步优化其性能。此外，本研究的样本量较小，且为回顾性单中心研究，因此未来的研究应考虑更大规模、多中心的前瞻性分析，以验证BCID2面板在实际临床中的广泛应用价值。