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大部分癌症相关死亡由转移引起,转移过程中肿瘤细胞脱离原发灶,通过血流到达新的组织,并在一定条件下发展为转移灶。通常把进入人体外周血的肿瘤细胞称为循环肿瘤细胞(CTCs)。CTCs早在140多年前就被发现,但CTCs在转移性癌症病人的外周血中存在的数量极少,109个细胞大概才含有一个CTC(约1-100个CTCs/ml全血),所以必须选择一种较好的方法进行CTCs的分离,富集及鉴定。传统方法处理繁琐,得率低,检测灵敏度不足,限制了CTC细胞研究和应用的发展,已经成为了技术瓶颈。 对于CTCs的分离及鉴定,Affymetrix公司旗下的Panomics产品线提供了CTCs分离以及RNA原位杂交检测的相关产品——ViewRNA™ CTC Platform to isolate and characterize circulating tumor cells (CTCs),并且应用这一技术的文章已经发表在顶级杂志Nature上。
Panomics 的CTCs Solution 主要通过两个步骤进行:首先分离CTCs,再对target RNA做原位杂交检测。 1. ScreenCell® filtration device循环肿瘤细胞分离装置 ScreenCell® filtration device是一种利用肿瘤细胞大小对其进行分离的过滤装置。此分离器用膜原理对较大的循环肿瘤细胞进行截留,将非肿瘤细胞进行过滤除去,可快速、简单的将循环肿瘤细胞进行分离。而截留在膜上的CTCs可进行后续的培养、固定,及做其他后续相关鉴定试验。 2. QuantiGene ViewRNA CTCs原位检测平台 QuantiGene ViewRNA分析平台是一种具有单拷贝灵敏度、能应用于基因定位和定量的原位杂交检测方法。它在应用于CTCs细胞检测时,可同时对4个以内的RNA进行检测(FISH)。QuantiGene ViewRNA分析平台基于拥有专利的探针组设计以及分支DNA(bDNA)信号放大技术。探针的独特设计有效地保证了检测的背景低、特异性好。同步放大且互相独立的信号放大系统使得该平台能够在一个细胞中同时对四个以内的目的RNA进行检测。
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