Nature子刊：一种替代Cre-lox系统的新方案

　　

西班牙国家心血管研究中心（CNIC）的科学家近日开发出Cre-lox系统的替代方案，能够解决一些技术问题。他们在《Nature Communications》杂志上发表了这个名为iSuRe-Cre的方案。

与传统的Cre报告基因相比，iSuRe-Cre等位基因准确报告了那些发生基因重组/敲除的细胞，大大降低了假阳性率。研究人员认为，这种新的遗传工具将明显提高条件性基因敲除的效率、简便性和可靠性。

在生物医学研究中，大多数基因功能分析都采用了Cre-lox技术。自1994年推出以来，这项技术彻底改变了生物医学研究，因为它能够破坏或激活小鼠任何细胞中任何基因的功能。Cre-Lox技术是在小鼠基因组的特定位置引入lox位点，然后利用Cre重组酶识别和重组lox位点，实现基因敲除。

尽管Cre-loxP技术对生物医学研究产生了重要影响，但许多研究表明使用时需要谨慎。主要问题在于Cre重组酶的活性有时不足以完全重组和敲除目标基因的表达，让人们无法确定是否实现了理想的遗传修饰。

此次开发的新方法利用一种名为iSuRe-Cre的等位基因，它与现有的各种Cre/CreERT2等位基因兼容，确保表达荧光报告基因的细胞具有高的Cre重组酶活性。这最终提高了基因功能分析的效率和可靠性。

此外，iSuRe-Cre小鼠的使用还允许在同一细胞中诱导多个基因敲除。利用这个重要的特点，人们可以研究功能性遗传相互作用或上位效应（epistasis），也就是说，一个或多个基因的功能如何依赖另一个基因的功能。

（图片来源：西班牙国家心血管研究中心）

在上图中，细胞分别表达iSuRe-Cre等位基因（黄色）和传统的报告基因（绿色）。只有黄色细胞的基因被敲除。

第一作者Macarena Fernández-Chacón表示：“这种新的遗传工具将对那些依赖于Cre-lox系统的研究项目产生重大影响，因为现在我们可以看到并确信发生基因敲除的细胞。”（生物通 薄荷）

原文检索

iSuRe-Cre is a genetic tool to reliably induce and report Cre-dependent genetic modifications

Nature Communications 10, Article number: 2262 (2019)