编辑推荐：
为攻克 EBV 阳性伯基特淋巴瘤（BL）治疗难题，研究人员开展 gp350-CAR-T 疗法研究，证实其抑瘤效果，为临床治疗带来新策略。
# 靶向 gp350 的 CAR-T 疗法：EBV 阳性伯基特淋巴瘤治疗的新曙光
在医学的微观世界里，病毒与肿瘤的 “暗战” 一直是科研人员关注的焦点。Epstein-Barr 病毒（EBV），作为疱疹病毒家族的一员，就像一个隐藏在人体中的 “潜伏杀手”，悄无声息地影响着全球超 90% 人口的健康。它不仅广泛潜伏在人体，还与多种恶性肿瘤的发生发展紧密相连，其中，伯基特淋巴瘤（Burkitt lymphoma，BL）就是它的 “重灾区”，尤其是在撒哈拉以南非洲等地区，几乎所有的 BL 病例都能检测到 EBV 的身影。
传统治疗 EBV 阳性 BL 的方法，如强化化疗和使用利妥昔单抗等单克隆抗体，虽然取得了一定的成效，但也面临着诸多困境。化疗在杀伤肿瘤细胞的同时，也会对正常细胞造成严重损伤，带来显著的毒性反应，长期使用还容易引发耐药性；而 EBV 擅长 “潜伏” 和躲避人体免疫系统的侦查，使得病情难以得到长期有效的控制。这些难题就像一道道难以跨越的鸿沟，横亘在患者和健康之间。
为了寻找新的治疗突破口，安徽医科大学第二附属医院等研究机构的研究人员踏上了探索之路，他们将目光聚焦在一种名为 gp350 的关键糖蛋白上。gp350 是 EBV 在裂解期表达的重要蛋白，它就像是病毒入侵 B 细胞的 “钥匙”，对于病毒的感染过程至关重要。而且，它只在 EBV 感染的细胞上表达，这一特性让它成为免疫治疗的理想靶点。基于此，研究人员开展了针对 gp350 的嵌合抗原受体 T 细胞（CAR-T）疗法研究，相关成果发表在《Journal of Translational Medicine》上。
在这场科研探索之旅中，研究人员运用了多种关键技术方法。他们利用免疫组化（IHC）技术，对淋巴瘤患者的组织样本进行检测，观察 gp350 的表达情况；通过流式细胞术分析不同细胞系中 gp350 的表达水平；还使用了共聚焦显微镜检测和蛋白质免疫印迹（Western blot）分析等技术，进一步验证 gp350 的表达和定位。在细胞实验方面，制备了 gp350-CAR-T 细胞，并通过与肿瘤细胞共培养，评估其对肿瘤细胞的杀伤能力；在动物实验中，构建了 BL 异种移植模型和肿瘤转移模型，研究 gp350-CAR-T 细胞在体内的治疗效果。
下面让我们一起走进他们的研究成果：
gp350 在淋巴瘤患者中的表达
研究人员通过免疫组化染色发现，在 EBER 阳性的淋巴瘤样本中，gp350 蛋白呈现高表达，而 EBER 阴性样本中则检测不到 gp350 的表达。在细胞系实验中，利用流式细胞术、共聚焦显微镜和 Western blot 分析进一步证实，EBV 阳性的 Namalwa 和 RAJI 细胞系高表达 gp350，而 EBV 阴性的 SUDHL-4 细胞系几乎不表达。这一系列结果表明，gp350 的表达与 EBV 感染密切相关，为其作为治疗靶点提供了有力依据。
gp350 靶向 CAR-T 细胞的转导效率
通过流式细胞术评估发现，CAR-T 细胞在体外扩增后具有较高的活力，转导效率达到 41.68%，其中 CD8+ T 细胞的转导效率显著高于 CD4+ T 细胞，这意味着成功制备了具有潜在治疗效果的 gp350-CAR-T 细胞。
gp350-CAR-T 细胞对肿瘤细胞的细胞毒性
将 gp350-CAR-T 细胞与不同肿瘤细胞系共培养，流式细胞术检测结果显示，gp350-CAR-T 细胞对 EBV 阳性的 Namalwa 和 RAJI 细胞具有显著的细胞毒性，且随着效应细胞与靶细胞（E:T）比例的增加，杀伤效果更明显；而对 EBV 阴性的 SUDHL-4 细胞则几乎没有杀伤作用。这充分体现了 gp350-CAR-T 细胞靶向杀伤 EBV 阳性肿瘤细胞的特异性。
gp350-CAR-T 细胞的细胞因子分泌分析
ELISA 检测发现，当 gp350-CAR-T 细胞与 EBV 阳性肿瘤细胞共培养时，会分泌大量的干扰素 -γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子 -α（TNF-α），且细胞因子的分泌量与 E:T 比例呈正相关；与 EBV 阴性细胞共培养时，则几乎不分泌这些细胞因子。这表明 gp350-CAR-T 细胞能针对 EBV 阳性肿瘤细胞触发强大的抗肿瘤免疫反应。
gp350-CAR-T 细胞抑制皮下肿瘤生长
在 BALB/C 裸鼠皮下接种 Namalwa 细胞构建 BL 异种移植模型，经尾静脉注射 gp350-CAR-T 细胞后发现，与对照组相比，治疗组的肿瘤体积和重量明显减小。组织学分析显示，治疗组肿瘤细胞出现广泛坏死和凋亡，增殖相关蛋白 Ki-67 和抗凋亡蛋白 BCL-2 表达降低，促凋亡蛋白 Bax 表达升高，且 CD3 阳性 T 细胞浸润增加。这表明 gp350-CAR-T 细胞在体内具有强大的抗肿瘤活性。
gp350-CAR-T 细胞显著抑制肿瘤扩散
通过在 NOD-SCID 小鼠体内构建肿瘤转移模型，利用生物发光成像监测发现，gp350-CAR-T 细胞能显著抑制 EBV 阳性肿瘤细胞的扩散，延长小鼠生存期；而对 EBV 阴性的 SUDHL-4 细胞的扩散则没有明显影响。这进一步证实了 gp350-CAR-T 细胞对 EBV 阳性肿瘤细胞的特异性抑制作用。
综合上述研究结果，该研究表明 gp350-CAR-T 细胞能够有效抑制 EBV 阳性 BL 细胞的生长和扩散，显著延长小鼠生存期。这一成果为 EBV 阳性 BL 患者带来了新的治疗希望，为临床应用提供了重要的实验依据。然而，目前的研究也存在一定的局限性，例如实验主要在小鼠模型上进行，与人类患者的实际情况可能存在差异；缺乏长期安全性数据等。未来，还需要进一步开展研究，利用更多的动物模型或患者来源的异种移植（PDX）模型进行验证，探索联合治疗方案，优化 CAR-T 细胞的制备工艺和给药方案，以提高治疗效果和安全性，让这一创新疗法真正造福患者。
