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为探究钩藤(Uncaria rhynchophylla)线粒体基因组结构变异与进化,广西药用植物园研究人员对其线粒体基因组进行测序分析,发现其由 1 个环形和 2 个线性 contig 组成,在系统发育分析中有独特价值,为研究钩藤属遗传提供重要依据。
钩藤线粒体基因组研究:填补遗传认知空白,解锁进化与药用价值新密码
在神秘的植物王国中,钩藤(Uncaria rhynchophylla)作为传统中药的瑰宝,一直以来凭借其治疗精神和心血管疾病的神奇功效备受关注。它那从叶腋处长出的独特钩状结构,不仅是其适应环境的独特标志,更是人们识别它的重要特征。然而,就像隐藏在黑暗中的宝藏,尽管已有关于钩藤叶绿体基因组的报道,但它的线粒体基因组却如同神秘的面纱,其结构变异和进化历程依旧模糊不清,严重阻碍了我们对钩藤遗传特性的深入探索。这一知识空白就像一道难以跨越的鸿沟,横亘在科研人员面前,促使他们踏上揭开钩藤线粒体基因组奥秘的征程。
为了攻克这一难题,广西药用植物园的研究人员勇挑重担,开展了一项极具意义的研究 —— 对钩藤线粒体基因组进行测序、组装和全面分析。经过不懈努力,研究成果发表在《BMC Genomics》期刊上,为我们打开了一扇了解钩藤遗传信息的新窗口。
在这场探索之旅中,研究人员巧妙运用了多种先进技术。他们从广西药用植物园实验研究基地的钩藤植株获取遗传材料,利用 Illumina 和 Nanopore 两种测序平台对钩藤线粒体基因组进行测序。在组装基因组时,采用 Unicycler 软件结合 Illumina 短读长和 Nanopore 长读长数据进行混合组装,还用 Flye 软件对 Nanopore 长读长数据进行从头组装,最终成功获得高质量的线粒体基因组序列。此外,运用多种软件对基因进行注释、分析密码子使用偏好、预测 RNA 编辑事件、识别重复序列、研究基因转移和共线性以及构建系统发育树,从多个角度对钩藤线粒体基因组进行剖析。
研究人员在探索钩藤线粒体基因组的道路上收获颇丰。在基因组特征方面,钩藤线粒体基因组打破了传统认知,并非单一的环状结构,而是由 1 个环形 contig 和 2 个线性 contig 组成,总长度为 421,660 bp,GC 含量为 44.69%。进一步注释发现,其中包含 36 个蛋白质编码基因(PCGs),这些基因犹如精密仪器中的重要零件,分别承担着不同的功能,如编码线粒体呼吸链关键组件和核糖体蛋白等;还有 16 个 tRNA 基因和 3 个 rRNA 基因,共同维持着线粒体的正常运转。而 3 号染色体比较特殊,上面没有功能性 PCGs,仅有 1 个 tRNA 基因。
密码子使用分析犹如一把钥匙,解锁了钩藤线粒体基因组进化的秘密。研究人员分析 36 个 PCGs 后发现,不同氨基酸对密码子有着独特的偏好。比如,丙氨酸(Ala)对 GCU 密码子表现出强烈的偏爱,其相对同义密码子使用(RSCU)值高达 1.62;酪氨酸(Tyr)则更倾向于 UAU 密码子,RSCU 值为 1.54。不过,赖氨酸(Lys)和苯丙氨酸(Phe)对密码子的偏好较弱,RSCU 值低于 1.2。这种密码子使用偏好现象,反映了钩藤在长期进化过程中为适应环境所做出的精细调整。
重复序列分析是研究钩藤线粒体基因组的重要一环。研究人员发现,线粒体基因组中散布着 215 个重复序列,这些重复序列在三条染色体上的分布并不均匀。1 号染色体的重复序列最为丰富,不仅有大量的简单序列重复(SSRs),还有较长的串联重复和分散重复;2 号染色体的重复序列相对较少;3 号染色体的重复序列则最少。深入研究还发现,部分重复序列在基因组重组中发挥着关键作用,4 对重复序列表现出显著的重组活性,不过其中 2 对重组频率较低,另外 2 对重组率超过 40% 。这些结果表明,重复序列就像基因组中的 “活跃分子”,虽然大多数时候比较 “低调”,但在某些关键时刻,它们能引发基因组的重组,推动基因组的进化。
RNA 编辑事件在钩藤线粒体基因组中也十分活跃。研究人员预测出 433 个潜在的 RNA 编辑位点,且这些位点都是胞嘧啶(C)替换为尿嘧啶(U)。其中,mttB基因的 RNA 编辑事件最多,有 37 个位点;ccmFN基因次之,有 34 个位点;而rpl2基因只有 1 个预测编辑位点,rps3基因则没有预测到编辑位点。这些 RNA 编辑事件如同基因组中的 “微调器”,可能对基因的表达和功能产生重要影响,进而影响钩藤的生理特性。
在基因转移和共线性分析方面,研究人员发现了 28 个线粒体质体 DNA(MTPT)同源片段,这些片段就像是叶绿体送给线粒体的 “礼物”,从叶绿体基因组转移到线粒体基因组,它们大多来源于叶绿体基因组的反向重复(IR)区域。功能注释显示,这些转移片段中包含 8 个完整的基因,包括 2 个 PCGs 和 6 个 tRNA 基因。对叶绿体基因组的共线性分析表明,钩藤与其他植物的叶绿体基因组在基因顺序上具有较高的保守性;但线粒体基因组的共线性分析却发现,钩藤的线粒体基因组与近缘物种相比,发生了大量的基因组重排,这说明钩藤线粒体基因组在进化过程中经历了独特的变化。
系统发育分析为我们揭示了钩藤在植物家族中的 “亲缘关系”。研究人员基于 26 个保守的线粒体 PCGs 对龙胆目(Gentianales)28 个物种进行系统发育分析,结果显示钩藤与咖啡(Coffea arabica)和水团花(Scyphiphora hydrophyllacea)的亲缘关系最为密切。与基于叶绿体基因组构建的系统发育树相比,线粒体基因组的分析结果能更清晰地确定一些物种间的关系,这表明线粒体基因组在解析植物系统发育关系方面具有独特的优势。
综合来看,研究人员成功组装并注释了钩藤的线粒体基因组,揭示了其复杂的结构和独特的序列特征。重复序列、RNA 编辑、基因转移等因素共同塑造了钩藤线粒体基因组的多样性和复杂性,推动了其进化。线粒体基因组在系统发育分析中的独特价值,为深入研究钩藤属植物的遗传关系提供了重要依据,有助于我们更好地理解钩藤的生物学特性,为其在医药领域的开发和利用奠定了坚实的基础。不过,目前的研究还存在一些局限性,如样本量不足、分析方法有待完善等。未来,还需要进一步扩大研究范围,优化研究方法,以便更全面、深入地探索钩藤线粒体基因组的奥秘,充分挖掘钩藤的药用潜力,为人类健康事业做出更大的贡献。