新型实时定量逆转录聚合酶链反应检测黑蜂王台病毒(BQCV)的研究成果
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时间:2025年03月07日
来源:Veterinary Research Communications 1.8
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为检测 BQCV,研究人员开发两种实时定量逆转录聚合酶链反应,可助力 BQCV 相关研究。
黑蜂王台病毒(BQCV)是一种在蜂群中引发隐性感染的常见病原体,全球范围内均有分布。在这项研究中,研究人员开发并验证了基于 TaqMan 探针和 EvaGreen(EG)染料的实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测方法,用于检测成年蜜蜂和幼虫 / 蛹中的 BQCV,该方法分别针对 BQCV 结构蛋白(SP)和非结构蛋白(NSP)的编码序列进行扩增。此外,研究人员还对比了实时 qRT-PCR 分析中常用的 EG 染料和 TaqMan 探针试剂的性能。BQCV-SP 的 TaqMan 和 EG 实时 qRT-PCR 检测的有效范围分别为 2.61 - 7.61 log10 RNA 拷贝 / 反应和 2.61 - 7.79 log10 RNA 拷贝 / 反应;BQCV-NSP 的 TaqMan 和 EG 实时 qRT-PCR 检测的有效范围分别为 6.83 - 11.83 log10 RNA 拷贝 / 反应和 6.98 - 11.98 log10 RNA 拷贝 / 反应 。基于这些新的检测方法,成年蜜蜂和幼虫 / 蛹中 BQCV 的流行率分别为 84%(88/105)和 44%(46/105)。BQCV 的病毒载量也在检测方法验证过程中所确定的有效范围内。EG 染料和 TaqMan 探针试剂在分析和诊断性能方面的分析结果相近。这些实时 qRT-PCR 检测方法对 BQCV 的检测具有高灵敏度和高特异性,将有助于 BQCV 的病因学和流行病学研究。
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