探秘利什曼原虫感染巨噬细胞中炎症性微小 RNA 的表达谱:利什曼原虫 RNA 病毒的潜在影响

【字体: 时间:2025年04月03日 来源:BMC Microbiology 4

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  为探究利什曼原虫 RNA 病毒 2(LRV2)对利什曼原虫(L. major)感染人巨噬细胞中微小 RNA(miRs)表达谱的影响,研究人员对相关样本进行检测分析。结果显示 miR-155、miR-146b 和 miR-133a 的表达谱因 LRV2 的存在有显著差异,这对揭示皮肤利什曼 iasis 发病机制有重要意义。

  利什曼病是一种由利什曼原虫引发的被忽视的热带疾病,每年新增病例众多,广泛流行于 98 个国家。它根据宿主和利什曼原虫种类的不同,表现为皮肤利什曼病(CL)、黏膜皮肤利什曼病(MCL)和内脏利什曼病(VL)等多种形式。人体的先天免疫反应在对抗利什曼原虫感染的早期防御中至关重要,其中中性粒细胞、树突状细胞和巨噬细胞发挥着关键作用 。不过,狡猾的利什曼原虫能够巧妙地逃避人体的免疫反应,在细胞内大肆繁殖。
近年来,研究发现利什曼原虫 RNA 病毒(LRV)在利什曼病的发展过程中起着重要作用。LRV 属于双链 RNA 病毒,分为 LRV1 和 LRV2,它们分别存在于不同地区的利什曼原虫中,对疾病的影响各不相同。LRV1 能够激活 Toll 样受体 3(TLR3),引发强烈的促炎反应,导致病情加重。相比之下,LRV2 在致病过程中的作用却知之甚少。

与此同时,微小 RNA(miRs)作为一类小型非编码 RNA 分子,在免疫反应中发挥着关键作用,它能够调节巨噬细胞的激活等过程。然而,目前关于 LRV 与 miRs 在利什曼病中的关系,研究还十分有限。为了深入探究这一领域,来自伊朗德黑兰医科大学等机构的研究人员开展了一项研究,旨在揭示感染 LRV2+和 LRV2-的 L. major 对 miRs 表达谱的影响。该研究成果发表在《BMC Microbiology》杂志上。

研究人员为开展此项研究,运用了多种关键技术方法。首先是样本采集与培养,从伊朗戈尔斯坦省转诊健康中心的 CL 患者处获取利什曼原虫分离株,并进行培养。接着通过 PCR 技术对利什曼原虫种类进行鉴定,利用半巢式 PCR 检测 LRV2 的存在。此外,还对 THP-1 细胞进行培养和激活,使其分化为巨噬细胞样细胞,之后与利什曼原虫共感染。最后,运用定量实时 PCR 技术检测 miR-155、miR-146b 和 miR-133a 的表达水平。

下面来看具体的研究结果:

  • 利什曼原虫鉴定和 LRV2 检测:研究挑选了两名 CL 患者的利什曼原虫分离株,经鉴定均为 L. major,其中一个为 LRV2-,另一个为 LRV2+
  • miR-155 的表达水平:在感染初期(0 小时),LRV2+菌株中 miR-155 的表达显著下降,而 LRV2-菌株则显著上升。随着感染时间的推移,在 12、24 和 36 小时,LRV2+和 LRV2-菌株中 miR-155 的表达均显著高于对照组。
  • miR-146b 的表达水平:在 0 小时和 24 小时,LRV2+和 LRV2-菌株中 miR-146b 的表达均高于对照组。不过在 12 小时,LRV2+菌株中 miR-146b 的表达显著下降,而 LRV2-菌株则无明显变化。到了 36 小时,两种菌株中 miR-146b 的表达又均显著下降。
  • miR-133a 的表达水平:在感染初期(0 小时)和 12 小时,LRV2+和 LRV2-菌株中 miR-133a 的表达均显著高于对照组。但在 24 小时和 36 小时,两种菌株中 miR-133a 的表达均显著下降,且 LRV2+菌株在 24 小时和 36 小时的下降幅度相较于 LRV2-菌株更为明显。

综合研究结果与讨论部分,这项研究意义重大。研究发现 miR-155、miR-146b 和 miR-133a 的表达谱因 LRV2 的存在而出现显著差异,这表明这些 miRs 在 CL 的发病机制中可能发挥着重要作用 。虽然研究并未观察到 LRV2+和 LRV2-分离株之间 miRs 表达水平的显著差异,但这一研究为后续进一步探究特定 miRs 在利什曼病免疫发生和发病机制中的作用奠定了基础,有助于科学家们更深入地了解利什曼病的发病机制,为开发新的治疗方法和干预措施提供了重要线索。
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