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为解决癌症治疗中耐药难题，尤其是 RAS 突变癌症的治疗困境，研究人员开展了关于 RAS 结合肽（RBP）作为抗癌生物材料的研究。结果显示 RBP 能抑制 RAS - RAF 相互作用，有效抑制癌细胞增殖、迁移和转移，为 RAS 突变癌症治疗提供新方向。
在癌症治疗的战场上，传统化学抑制剂虽有一定成效，但耐药问题却如同一座难以翻越的大山，尤其是在面对像三阴性乳腺癌（TNBC）这样的难治性癌症时，更是束手无策。TNBC 缺乏雌激素受体 α（ERα）、孕激素受体（PR）和人表皮生长因子受体 2（HER2/ERBB2）这些常见的治疗靶点，使得常规治疗手段效果不佳，患者的治疗选择极为有限。而 RAS 基因家族的突变，虽然在乳腺癌中频率相对较低，但却在肿瘤的发生发展中起着关键作用。其中，KRAS（G13D）突变的癌细胞更是难以对付，传统的针对 RAS 活性位点的化学抑制剂，往往因为无法精准识别激活状态的 KRAS（G13D），导致整体抗肿瘤活性受限，还容易引发肿瘤耐药。在这样的背景下，寻找一种高效、低毒且能克服耐药问题的新型抗癌生物材料迫在眉睫。
为了攻克这些难题，研究人员展开了深入研究。他们将目光聚焦于一种合成的细胞穿透肽 ——RAS 结合肽（RBP），探究其作为抗癌生物材料的潜力。最终研究发现，RBP 能够有效抑制癌细胞的增殖、迁移和转移，显著抑制肿瘤生长，为 RAS 突变癌症的治疗带来了新的希望。该研究成果发表在《BIOMATERIALS RESEARCH》上。
研究人员在这项研究中运用了多种关键技术方法。在细胞实验方面，利用细胞计数试剂盒 - 8（CCK - 8）检测细胞活力，通过肿瘤集落形成实验、球体形成实验评估细胞的增殖和自我更新能力，采用 Transwell 迁移实验和划痕实验测定细胞迁移能力。在分子机制研究上，运用表面等离子共振（SPR）技术测定 RBP 与 KRAS、RAF 的结合亲和力，通过免疫沉淀（IP）和蛋白质免疫印迹（Western blot）分析相关蛋白的表达和相互作用。此外，还构建了鸡胚异种移植模型和小鼠异种移植模型，在体内验证 RBP 的抗癌效果。
下面来看具体的研究结果：
- RBP 的特性及细胞内定位：RBP 由 8 个碱性氨基酸组成，在 pH7.0 时带强正电荷（+8.86），这使其具有良好的细胞穿透能力。通过共聚焦显微镜和流式细胞术观察发现，RBP 能在 10 分钟内有效进入 MDA - MB - 231 细胞的细胞质，且 99.98% 的细胞内化了 RBP。
- RBP 与 RAS 和 RAF 的结合亲和力：通过 BIAcore 方法测定，RBP 与 GppNHp - KRAS（G13D）的结合亲和力（KD = 40nM）约为 GppNHp - KRAS（G13D）与 RAF 结合亲和力（KD = 154nM）的 3 倍，且 RBP 不与无关受体整合素 α3 结合，表明其对 RAS 和 RAF 具有高度选择性。免疫沉淀实验也证实了 RBP 能与 RAS 结合，计算机模拟显示 RBP 通过静电排斥和相互作用破坏 KRAS - RAF 相互作用。
- RBP 对癌细胞增殖、集落形成和球体形成的抑制作用：以多种癌细胞系为研究对象，CCK - 8 实验表明 RBP 能以剂量依赖的方式降低 KRAS G13D 突变细胞的存活率，对野生型 KRAS 细胞影响不显著，因此选择 200μM RBP 用于后续实验。在集落形成实验和球体形成实验中，RBP 处理组的细胞集落面积和球体数量均明显减少，说明 RBP 能有效抑制肿瘤生长。
- RBP 的体外抗转移作用：划痕实验和 Transwell 迁移实验结果显示，RBP 显著抑制 MDA - MB - 231 细胞的迁移，且 Western blot 分析发现 RBP 处理组的 E - cadherin 表达增加，表明 RBP 具有强大的抗转移作用。
- RBP 对 RAS - MAPK 通路的抑制作用：IP 实验和 Western blot 分析表明，RBP 能显著降低 MDA - MB - 231 和 HCT - 116 细胞中 RAF 结合的 RAS 水平，抑制 RAF 激活和 ERK1/2 磷酸化，而对 MCF - 7 和 HT - 29 细胞无明显影响，证实 RBP 能有效抑制 RAS - MAPK 通路。
- RBP 在鸡胚异种移植模型中的抗癌效果：在鸡胚异种移植模型中，10mg/kg 的 RBP 处理组与阴性对照组相比，死亡率无显著差异，表明 RBP 无明显毒性。RBP 处理组的肿瘤重量明显降低，肿瘤血管生成减少，转移细胞数量显著下降。组织学分析显示，RBP 处理组的 Ki - 67 表达降低，免疫细胞（CD3 和 CD4 阳性细胞）浸润增加。
- RBP 在小鼠异种移植模型中的抗癌效果：在小鼠异种移植模型中，Cy5.5 标记的 RBP 在注射后能迅速分布到肿瘤组织，并在 24 - 48 小时内保持较高的荧光强度。RBP 处理组的肿瘤生长明显受到抑制，组织学分析显示肿瘤形态改变，Ki - 67 表达降低，免疫细胞浸润增加。
综合研究结论和讨论部分，RBP 作为一种新型的抗癌生物材料，展现出了多方面的优势。它能够穿透癌细胞，特异性地抑制 RAS - RAF 相互作用，阻断下游的 ERK/MAPK 信号通路，从而有效抑制癌细胞的迁移、增殖和转移。与传统的化学抑制剂相比，RBP 具有更高的特异性和更低的耐药性风险，有望克服现有 KRAS 靶向治疗中的诸多难题。此外，RBP 还能促进免疫细胞浸润，增强机体的免疫反应，为癌症治疗提供了新的策略。这一研究成果为 RAS 突变癌症的治疗开辟了新的方向，为开发更有效的抗癌药物提供了重要的理论依据和实践基础，具有重大的临床应用潜力。
