基于奥希替尼骨架的含亚胺结构三突变EGFR激酶抑制剂的设计、合成与生物活性评价

针对非小细胞肺癌(NSCLC)中EGFR三重突变(L858R/T790M/C797S)导致的第三代EGFR-TKIs耐药问题，研究人员以奥希替尼为骨架设计新型含亚胺片段可逆抑制剂。最优化合物DD-8对三突变EGFR激酶抑制活性(IC50=0.87 nM)优于布加替尼，细胞实验显示其抑制BaF3-EGFR(L858R/T790M/C797S)增殖的IC50达1.11 μM，并通过凋亡诱导、周期阻滞等机制证实其抗肿瘤潜力，为克服C797S耐药提供新策略。

　　

肺癌长期占据全球癌症死亡率首位，其中非小细胞肺癌(NSCLC)患者常伴随表皮生长因子受体(EGFR)突变。尽管第三代EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)如奥希替尼能有效抑制T790M突变，但C797S位点的获得性突变导致药物结合位点丧失，成为临床耐药的新挑战。面对这一困境，辽宁大学的研究团队在《Bioorganic Chemistry》发表研究，通过结构优化开发出能靶向三重突变(L858R/T790M/C797S)的新型抑制剂。

研究采用基于结构的药物设计策略，重点改造奥希替尼中因C797S突变失效的α,β-不饱和酰胺结构。通过核磁共振(600/400 MHz)表征中间体，结合激酶抑制实验筛选活性化合物，并运用细胞增殖检测(CCK-8法)、流式细胞术分析凋亡与周期、Western blot验证信号通路抑制、Transwell迁移实验及分子对接等技术系统评估候选分子。

化学合成与活性筛选
通过AlCl₃催化缩合反应构建吡啶并嘧啶核心骨架，引入亚胺片段获得DD系列化合物。激酶实验显示含亚胺结构的DD-8对三突变EGFR抑制活性(IC₅₀=0.87 nM)较前体化合物提升157倍，且具有可逆结合特性。

生物学功能验证
在BaF3-EGFR(L858R/T790M/C797S)细胞中，DD-8的增殖抑制IC₅₀为1.11 μM(2 μM时抑制率98.8%)。机制研究表明其通过激活caspase-3诱导凋亡，将细胞阻滞于G0/G1期，并显著抑制EGFR磷酸化及下游STAT3/MAPK信号通路。

药代动力学特性
肝微粒体稳定性实验显示DD-8代谢半衰期达42分钟，分子对接揭示其亚胺结构与Met793形成关键氢键，疏水腔相互作用维持了与突变激酶的紧密结合。

该研究突破了三代EGFR-TKIs的耐药限制，首次证实奥希替尼骨架经亚胺修饰后可实现高效可逆抑制。DD-8对三重突变的选择性优于野生型EGFR，潜在毒副作用更低，为开发第四代EGFR-TKIs提供了新思路。未来研究需进一步优化化合物代谢稳定性，推动其向临床转化。