编辑推荐：
慢性酒精摄入引发免疫反应致细胞损伤，导致酒精性肝病（ALD），目前无 FDA 批准疗法。研究人员探究 Gardenin A（GarA）对 HepG2 和 Caco2 细胞的保护作用，发现其能减轻氧化应激和炎症，有望成为治疗 ALD 的候选药物。
酒精，这个在生活中常见的饮品，若是过度饮用，却会摇身一变成为健康的 “杀手”。世界卫生组织早在 2018 年就发出警告：没有任何剂量的酒精是安全的。长期大量饮酒，会引发一系列严重的健康问题，其中酒精性肝病（ALD）尤为突出。
正常情况下，低浓度酒精主要通过酒精脱氢酶（ADH）途径代谢。但当饮酒成为一种长期习惯，情况就变得复杂起来。此时，细胞色素 P4502E1（CYP2E1）和过氧化氢酶途径等替代代谢通路被启动。这些通路在代谢酒精的过程中，会产生有毒且致癌的乙醛。乙醛不仅能形成新抗原、DNA - 蛋白质加合物，还会催生大量活性氧（ROS），一步步侵蚀线粒体，让细胞陷入危机。
酒精及其代谢产物还会激活补体系统，这一过程就像在平静的湖面投下巨石，引发阵阵涟漪。补体成分 C3 和 C5 分别产生过敏毒素 C3a 和 C5a，它们与库普弗细胞（KCs）上的相应受体（C3aR 和 C5aR1）结合，进而激活 Toll 样受体 4 / 核因子 κB（TLR - 4/NFκB）通路。这一通路的激活，会使肿瘤坏死因子 α（TNF - α）表达上调，肝脏炎症和损伤就此加剧。
与此同时，肠道这个微生物的 “家园” 也深受酒精的影响。慢性饮酒会破坏肠道菌群的平衡，增加肠道的通透性，让微生物产物如脂多糖（LPS）趁机进入血液循环。LPS 又会激活 TLR - 4 通路，进一步升高促炎细胞因子的水平，特别是 TNF - α，让肝脏的炎症 “雪上加霜”。
令人沮丧的是，目前美国食品药品监督管理局（FDA）尚未批准任何针对 ALD 的治疗方法。此前研究的甾体类药物，虽然有一定效果，但因其副作用众多，会给患者带来额外的健康风险。
在这样的背景下，从植物中提取的天然化合物成为了研究的新方向。这些植物化学物质具有抗氧化和抗炎的特性，而且副作用小、生物活性高。Gardenin A（GarA，C21H22O9）就是这样一种备受关注的物质，它是一种具有三环结构和多甲氧基化的黄酮，在栀子花属等植物中含量较高。虽然它在代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MAFLD，曾称非酒精性脂肪性肝病 NAFLD）和神经保护方面展现出了一定的潜力，但在 ALD 中的抗炎和抗氧化作用还未被深入探索。
为了填补这一空白，来自未知研究机构的研究人员开展了一项针对 GarA 在 ALD 中作用的研究，相关成果发表在《Bioorganic Chemistry》杂志上。
研究人员采用了多种关键技术方法。首先，他们从市售的栀子花树脂胶中分离出了纯的 GarA，采用的是改良的分离方法，通过闪式色谱技术，观察到随着乙酸乙酯的蒸发，出现了针状晶体结构的 GarA。在细胞实验方面，利用 MTT 法检测细胞活力，通过不同的染色技术进行脂质积累测定、ROS 水平检测以及细胞核形态观察。同时，运用逆转录 - 定量聚合酶链反应（RT - qPCR）检测各种促炎和抗炎细胞因子、CYP2E1、甾醇调节元件结合蛋白 - 2（SREBP2）以及对肠道屏障完整性至关重要的紧密连接基因的表达。此外，采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测关键蛋白靶点，如磷酸化和总形式的 AMP 激活蛋白激酶（AMPK）、TNF - α、C5aR1、血红素加氧酶 - 1（HO - 1）和核因子红细胞 2 相关因子 2（Nrf2）。
在细胞活力检测实验中，研究人员发现 GarA 在浓度为 10 μM/ml 时，能使细胞活力达到最高。这一浓度为后续实验奠定了基础，表明 GarA 在这个浓度下可能对细胞有积极的作用。
脂质积累测定实验中，GarA 展现出了显著的效果。它能够明显减少细胞内的脂滴数量。这一结果意义重大，因为脂质在肝脏细胞内的过度积累是酒精性肝病的一个重要特征，GarA 的这种作用可能有助于缓解肝脏的脂肪变性，减轻肝脏的负担。
在 ROS 水平检测实验中，研究发现 GarA 能有效降低 ROS 水平。ROS 作为酒精代谢过程中产生的有害物质，会对细胞造成氧化损伤。GarA 降低 ROS 水平，意味着它可以减轻细胞的氧化应激状态，保护细胞免受氧化损伤，维持细胞的正常功能。
通过 RT - qPCR 检测细胞因子的表达，研究人员发现 GarA 能显著下调促炎细胞因子的表达。这表明 GarA 具有抗炎活性，能够抑制炎症反应，减少炎症对肝脏和肠道细胞的损害，有助于维持组织的正常生理状态。
ELISA 检测结果显示，GarA 能够调节关键蛋白靶点的表达。例如，它可以激活 AMPK 通路，促进 Nrf2 的表达，同时上调 HO - 1 的表达。AMPK 通路的激活有助于减少脂质积累、增强线粒体功能；Nrf2 的激活则能上调抗氧化防御系统，HO - 1 的增加进一步增强了细胞的抗氧化能力。这些变化协同作用，使得细胞的抗氧化和抗炎能力得到显著提升。
分子对接的计算机模拟（in - silico）研究发现，GarA 与 C5aR1 和 TNF - α 存在保守的氨基酸相互作用和亲和力。这一结果从分子层面解释了 GarA 的抗炎机制，为其在治疗 ALD 中的应用提供了更坚实的理论依据。
综合以上研究结果，该研究首次探索了 GarA 对 ALD 的影响，充分证实了 GarA 具有显著的抗炎和抗氧化活性。它能够通过激活 AMPK/Nrf2 通路，减轻酒精诱导的氧化应激和炎症反应，维持肠道屏障和细胞核的完整性。这一研究成果意义非凡，不仅为 ALD 的治疗提供了新的潜在药物候选物，也为后续相关研究开辟了新的方向，有望为众多深受 ALD 困扰的患者带来新的希望 。
