树突状细胞MyD88表达对轮状病毒诱导B细胞活化的关键作用

这篇研究揭示了树突状细胞（DC）通过Toll样受体（TLR）信号通路分子MyD88和I型干扰素受体（IFNAR）介导轮状病毒（RV）诱导的B细胞活化。通过体内外实验证实，CD11c+ DC是Peyer斑（PP）中B细胞早期活化的必需细胞群，而MyD88缺陷会显著抑制B细胞CD69+上调和病毒特异性IgA产生。该发现为黏膜疫苗设计提供了新靶点，阐明了肠道病毒免疫中T细胞非依赖性抗体应答的分子机制。

　　

ABSTRACT

肠道IgA由局部B细胞产生，是抵御轮状病毒（RV）感染的关键防线。研究发现，RV能在缺乏T细胞的情况下快速诱导Peyer斑（PP）B细胞活化，而CD11c⁺树突状细胞（DC）是这一过程的核心调控者。体内清除CD11c⁺细胞会完全阻断B细胞活化，体外实验进一步证实仅CD11c⁺细胞（非T或CD11b⁺细胞）能介导RV诱导的B细胞CD69⁺上调。机制研究表明，DC的MyD88依赖的TLR信号和I型干扰素受体（IFNAR）通路是B细胞活化的必要条件。

INTRODUCTION

轮状病毒作为双链RNA病毒，其清除与肠道IgA应答密切相关。尽管T细胞缺失小鼠仍能产生保护性抗体，但B细胞或IgA缺陷小鼠难以清除感染。RV感染48小时内即可触发PP中B细胞的快速活化，伴随DC数量增加和亚上皮穹窿区迁移。此前研究发现，DC可通过经典（如CD40/CD40L）和非经典（如BAFF/APRIL）途径激活B细胞，但RV诱导的T细胞非依赖性应答具体机制尚未明确。

RESULTS

RV同步激活PP中的B细胞与DC
流式分析显示，RV感染小鼠PP中CD19⁺/CD69⁺ B细胞和CD11c⁺ DC活化显著增加，而CD4⁺ T细胞无变化。

CD11c⁺细胞缺失阻断B细胞活化
通过CD11c-DTR转基因小鼠清除DC后，B细胞活化标志CD69⁺和局部RV特异性抗体分泌均显著降低，证实DC在体内不可或缺。

体外验证DC的充分必要性
分选实验表明，仅CD11c⁺细胞与B细胞共培养时可恢复RV诱导的活化，而纯化B细胞或添加CD4⁺ T细胞均无效。该现象在C57BL/6、BALB/c等多种小鼠品系中一致。

MyD88与I型干扰素通路的核心作用
筛选多种基因缺陷小鼠发现，MyD88^?/?和IFNAR^?/?细胞完全丧失RV响应性，但BAFF/APRIL缺陷无影响。有趣的是，MyD88缺失DC虽能正常分泌干扰素α（IFNα），却无法激活B细胞，提示MyD88在DC中的特异性功能。

DISCUSSION

研究明确了DC通过MyD88-TLR信号桥接RV识别与B细胞活化，而非依赖传统BAFF/APRIL途径。值得注意的是，即使B细胞受体（BCR）缺陷（如XID或MD4小鼠）仍能被RV激活，表明存在BCR非依赖性机制。该发现为理解肠道病毒快速免疫应答提供了新视角，也为开发靶向DC的黏膜疫苗策略奠定基础。未来需进一步解析MyD88下游如何协调IFNα信号驱动IgA类别转换。

MATERIALS AND METHODS

实验采用CD11c-DTR、MyD88^?/?等转基因小鼠，通过流式细胞术、ELISA和细胞分选等技术，结合体内DC清除和体外共培养模型，系统评估了B细胞活化机制。统计学分析采用Mann-Whitney U检验，显著性阈值设为P<0.05。