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在葫芦科作物研究中,TCP 基因功能未知。研究人员对葫芦科 7 个物种的 TCP 基因展开研究,发现其扩张受多种复制事件驱动,且参与生长发育及应激反应。该研究为葫芦科作物遗传改良提供依据。
在植物的奇妙世界里,转录因子(TFs)就像一个个精密的指挥官,掌控着植物生长、代谢以及应对环境变化的各种进程。TCP 基因作为植物特有的转录因子家族,在植物的生命活动中扮演着至关重要的角色,参与种子萌发、叶片形态建成、花朵发育等多个过程。然而,在葫芦科这个拥有众多重要蔬菜和水果作物的家族中,TCP 基因的具体作用却一直是个谜。葫芦科作物,像香甜的甜瓜、清脆的黄瓜、多汁的西瓜等,不仅是人们餐桌上的常客,还在农业经济中占据重要地位。了解葫芦科作物 TCP 基因的奥秘,对于提高作物产量、改善品质以及增强作物对环境压力的抵抗力有着重要意义。为了揭开这个谜团,聊城大学的研究人员展开了深入的探索。
研究人员通过对葫芦科 7 个代表性物种(甜瓜(C. melo)、黄瓜(C. sativus)、西瓜(C. lanatus)、瓠瓜(L. siceraria)、南瓜(C. maxima)、中国南瓜(C. moschata)和西葫芦(C. pepo))的基因组和转录组数据进行分析,系统地研究了 TCP 基因家族。该研究成果发表在《Scientific Reports》上,为葫芦科作物的遗传改良提供了重要的理论基础。
研究人员运用了多种关键技术方法。首先,利用 HMMER 软件,基于模型植物的 TCP 蛋白序列,在 7 个葫芦科物种的基因库中搜索候选 TCP 基因,并通过在线工具去除冗余序列、检测结构域,从而准确鉴定出 TCP 基因。其次,借助 TBtools、MCScanX 等软件进行共线性分析,探究基因的复制事件和染色体定位。此外,运用 MEGA 11 软件构建系统发育树,分析基因的进化关系;利用 agriGo 和 PlantCARE 等在线工具分别进行 GO 富集分析和启动子顺式调控元件分析;通过对已发表的 RNA-seq 数据进行挖掘,研究 TCP 基因在不同组织和应激条件下的表达模式。
1. TCP 基因的鉴定与基本信息
研究人员在 7 个葫芦科物种基因组中成功鉴定出 230 个 TCP 基因。这些基因在不同物种中的数量有所差异,分布于整个基因组,但在染色体上并非均匀分布。对其基本信息分析发现,TCP 蛋白长度、分子量、等电点(PI)、稳定性以及亲水性等存在差异,多数 TCP 基因编码稳定且亲水的蛋白1。
2. 基因结构与共线性分析
通过对 TCP 基因结构分析发现,多数基因含有 1 - 2 个编码序列(CDS)区域,但不同部落存在差异。共线性分析显示,节段性复制在 TCP 基因扩张中起关键作用,在不同物种中均检测到大量节段性复制事件,且葫芦瓜族(Cucurbiteae)的复制事件多于南瓜族(Benincaseae)23。
3. TCP 基因整合图谱的构建
以甜瓜基因组为参考进行共线性分析,发现不同葫芦科物种间存在大量共线区域和基因对。研究构建了包含 29 个 TCP 位点的整合遗传图谱,多数位点为各物种共有,这有助于深入了解 TCP 基因在染色体上的分布和进化45。
4. 系统进化与复制事件分析
构建的 ML 进化树显示,230 个 TCP 蛋白分为 I 类和 II 类,II 类又进一步分为 CIN 和 CYC/TB1 分支 ,且分类和功能在进化中保守。通过计算同义替换率(Ks)和非同义替换率(Ka)及其比值(Ka/Ks),发现多数 TCP 基因经历了纯化选择,表明其在进化过程中相对稳定67。
5. GO 富集与顺式调控元件分析
GO 富集分析表明,TCP 基因参与许多下游转录网络,主要在细胞核中发挥功能,涉及多种生物学过程。启动子区域的顺式调控元件分析发现,光响应元件最为普遍,其次是脱落酸(ABA)和茉莉酸甲酯(MeJA)响应元件 ,这些元件与植物激素信号传导和生长发育密切相关89。
6. 不同组织中 TCP 基因的表达谱
分析不同组织的 RNA-seq 数据发现,TCP 基因在不同组织中的表达存在差异,在叶片中普遍呈中度表达,部分基因在花、茎等组织中高表达,这表明不同 TCP 基因在植物生长发育的不同阶段和组织中发挥着特定作用1011。
7. 响应非生物和生物胁迫的 TCP 基因转录激活
研究发现,在冷胁迫、盐胁迫、白粉病和霜霉病胁迫下,TCP 基因的表达模式发生变化,表明其参与了葫芦科植物对非生物和生物胁迫的响应,不同基因在不同胁迫下的表达变化不同,体现了其功能的多样性1213。
在讨论部分,研究人员指出,该研究首次系统分析了葫芦科的 TCP 基因。葫芦科物种的 TCP 基因数量与基因组大小无必然联系,且在进化和功能上具有保守性。基因复制事件,特别是节段性复制和全基因组复制(WGD),是 TCP 基因家族扩张的主要驱动力。TCP 基因启动子区域存在多种顺式调控元件,使其参与激素信号传导和多种应激反应。不同物种在面对非生物和生物胁迫时,TCP 基因的转录谱相似,暗示其在基因调控方面具有进化保守性。 这项研究为葫芦科作物的分子调控、品质改良和植物育种提供了重要的理论依据,有助于进一步挖掘 TCP 基因在葫芦科作物中的潜在价值,推动葫芦科作物遗传改良工作的发展,对农业生产有着重要的指导意义。