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在生物多样性面临严峻挑战的当下，物种界定的规范至关重要。研究人员针对广泛分布于墨西哥和中美洲的蛙类（Rana pipiens复合体），开展区分种内和种间遗传变异的研究。结果发现 10 个现有物种划分有误，还确认 3 个新物种，为物种界定提供重要参考。
物种常常依据形态和遗传多样性的差异来识别。然而，在亲缘关系相近的物种之间常见的差异水平，在地理分布广泛的物种的不同种群间也能看到。研究人员提出并测试了一套流程，用于区分分类复杂的蛙类群体中的种内和种间多样性。研究发现，地理变异导致 10 个蛙类物种被过度描述；同时，还识别出 3 个此前未被描述的新物种。研究强调，要检验物种假设，必须对种群间的基因流进行明确测试。在没有生殖隔离的确切证据时，研究人员的默认假设应是单个物种内的变异。
在生物多样性空前丧失的时代，描述生物变异的标准化方法愈发重要。物种界定作为科学研究的关键环节，必须明确、可检验且可证伪。区分物种内变异和物种间变异是物种界定的基础任务。许多分布广泛的物种，其遗传变异水平与已明确界定的同域物种间的变异水平相当，甚至更高。研究人员提供了一套区分种内和种间遗传变异的流程，并将其应用于墨西哥和中美洲广泛分布的分类存在问题的蛙类（豹蛙，Rana pipiens复合体）。该流程利用了最新进展，将基因组规模的数据集与基于模型的物种界定方法相结合，同时强调需要有生殖隔离的积极证据，以确认地理连续物种边界的有效性。研究结果显示，广泛分布的豹蛙物种的种内地理变异导致了物种分类的膨胀，目前已确认的 10 个物种在分析中未得到支持，研究人员将它们与先前命名的分类单元同义化。此外，研究还发现了 3 个未被描述物种存在的确切证据。除了提出这些分类学上的变化，研究人员还说明了哪些数据或分析能够反驳和推翻他们的建议。研究人员建议，所有物种界定研究（尤其是针对地理变异群体的研究）都应明确，哪些新证据足以改变分类学建议。
