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为解决大黄鱼疾病频发阻碍养殖业发展的问题,研究人员开展了对大黄鱼 IL-18(LcIL-18)的分子特征和功能分析研究。结果发现LcIL-18 参与病原菌诱导的炎症反应,这对大黄鱼疾病防控意义重大。
在水产养殖领域,大黄鱼(
Larimichthys crocea)作为我国重要的海水养殖鱼类,近年来却遭遇了诸多困境。各种疾病不断侵袭,让养殖户们愁眉不展,大量的经济损失接踵而至,整个养殖产业的发展也因此受到严重阻碍。白细胞介素 - 18(Interleukin-18,IL-18)作为免疫系统中的重要成员,在哺乳动物抵御病原体感染时发挥着关键作用。然而,在鱼类中,IL-18 的功能却如同神秘的面纱,让人捉摸不透。大黄鱼体内的 IL-18 究竟扮演着怎样的角色?它在大黄鱼对抗疾病的过程中又能发挥多大的作用呢?为了揭开这些谜团,来自国内的研究人员踏上了探索之旅。
研究人员针对大黄鱼 IL-18 展开了深入研究,成功克隆出了LcIL-18 基因。经过一系列的实验和分析,他们发现LcIL-18 参与了由病原菌诱导的炎症反应。这一发现意义非凡,为大黄鱼疾病的防控提供了新的思路和理论依据,有望帮助养殖户们解决实际问题,推动大黄鱼养殖业的健康发展。该研究成果发表在《Fish》杂志上。
在研究过程中,研究人员主要运用了以下关键技术方法:一是基因克隆技术,用于获取LcIL-18 的开放阅读框(ORF);二是细胞培养技术,培养大黄鱼头部肾脏(LYCK)细胞,为后续实验提供细胞模型;三是序列分析技术,对LcIL-18 的基因和蛋白序列进行分析,探究其特征。实验所用大黄鱼样本购自宁德福发渔业有限公司。
研究结果
- LcIL-18 的序列分析:成功克隆出LcIL-18 的 ORF,其长度为 609bp,编码 202 个氨基酸的蛋白质,理论分子量为 23.41kDa,等电点为 5.39。该蛋白具有典型的 IL-1 结构域和 IL-1 家族特征序列。
- LcIL-18 的组织表达谱:研究发现LcIL-18 在大黄鱼的 12 种组织中均有组成型表达,其中在鳃中的表达量最高。这表明LcIL-18 在大黄鱼的多个组织中都可能发挥作用,尤其是在鳃这一重要的呼吸和免疫器官中。
- 病原菌感染对LcIL-18 表达的影响:用Pseudomonas plecoglossicida和Vibrio alginolyticus感染大黄鱼后,LcIL-18 在头肾、脾脏、皮肤、鳃和肝脏中的表达呈现出不同的模式。P. plecoglossicida能强烈诱导这些组织中LcIL-18 的表达,而在感染早期,V. alginolyticus会显著抑制头肾、脾脏、皮肤和鳃中LcIL-18 的表达,但对肝脏中的表达无明显影响。这说明不同病原菌对LcIL-18 表达的调控存在差异。
- 体外刺激对LcIL-18 表达的影响:在体外实验中,脂多糖(LPS)、聚肌胞苷酸(Poly (I:C))、P. plecoglossicida和V. alginolyticus均能显著上调 LYCK 细胞中LcIL-18 的表达。这进一步证明了LcIL-18 的表达会受到多种病原体相关分子和病原菌的影响。
- 重组LcIL-18(rLcIL-18)的功能研究:rLcIL-18 能显著提高 LYCK 细胞的活力,并上调促炎细胞因子(LcIL-1β、LcIL-6 和LcTNF-α1)的表达。这表明 rLcIL-18 在调节细胞活性和炎症反应方面具有重要作用。
研究结论与讨论
研究人员成功克隆了大黄鱼的LcIL-18 基因,并对其进行了全面深入的研究。LcIL-18 的结构特征与哺乳动物的 IL-18 有相似之处,且在大黄鱼体内广泛表达。不同病原菌感染会导致LcIL-18 呈现出不同的表达模式,体外多种刺激也能影响其表达。此外,rLcIL-18 具有调节细胞活力和促炎细胞因子表达的功能,这充分表明LcIL-18 参与了病原菌诱导的炎症反应。
尽管在哺乳动物中,IL-18 的功能已经得到了较为深入的研究,但在硬骨鱼类中,其功能仍有待进一步挖掘。此次对大黄鱼LcIL-18 的研究,为我们理解鱼类 IL-18 的功能提供了重要线索。这不仅有助于我们深入了解鱼类的免疫系统,也为未来开发针对大黄鱼疾病的新型防控策略奠定了坚实的理论基础。未来,研究人员可以在此基础上,进一步探究LcIL-18 在大黄鱼免疫应答中的具体分子机制,以及如何通过调控LcIL-18 的表达来增强大黄鱼的抗病能力,从而更好地推动大黄鱼养殖业的可持续发展。