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为探究 TRIM21 在出血性肝缺血 / 再灌注（I/R）损伤中的作用机制，研究人员构建小鼠模型及体外肝细胞损伤模型，发现 TRIM21 上调可通过调控 SLC7A11 蛋白稳定性促进铁死亡诱导的 NETs 形成，加剧损伤，敲低 TRIM21 则可缓解。该研究为相关治疗提供新策略。
肝脏作为人体重要的代谢器官，在出血性休克等危急病症中极易因缺血缺氧遭受损伤，而缺血后的血流恢复（即再灌注）又会引发更复杂的二次伤害，如活性氧（ROS）爆发、炎症反应失控等，这一系列过程被称为肝缺血再灌注（I/R）损伤。目前，尽管快速止血和液体复苏是抢救出血性休克的关键步骤，但如何有效减轻随之而来的肝 I/R 损伤仍是临床难题，其背后的分子机制尚未完全明晰，亟需找到新的治疗靶点和干预策略。
为了攻克这一科学问题，深圳南山区人民医院的研究人员开展了相关研究，旨在揭示 TRIM21（三结构域蛋白 21）在出血性肝 I/R 损伤中的作用及机制。研究发现，敲低 TRIM21 可通过抑制铁死亡（一种依赖铁的脂质过氧化性细胞死亡方式）诱导的中性粒细胞胞外陷阱（NETs，由 DNA、组蛋白和抗菌蛋白组成的网状结构）形成，显著减轻肝 I/R 损伤。该研究成果发表在《Scientific Reports》上，为出血性肝损伤的治疗提供了全新的思路。
研究人员主要采用了以下关键技术方法：构建 C57BL/6 小鼠出血性肝 I/R 模型，通过颈动脉和颈静脉插管模拟失血性休克及肝血管夹闭缺血 - 再灌注过程；建立体外肝细胞氧葡萄糖剥夺 / 复氧（OGD/R）损伤模型；运用 HE 染色观察肝组织病理变化，TUNEL 染色检测肝细胞凋亡；通过 ELISA 法检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）及氧化应激指标（MDA、GSH、SOD）；利用免疫荧光和免疫组化技术检测 TRIM21、SLC7A11、Cit-H3、MPO 等蛋白的表达及定位；采用实时荧光定量 PCR（qPCR）和 Western blot 分析炎症因子及铁死亡相关蛋白的转录和翻译水平；通过免疫共沉淀（Co-IP）和泛素化实验验证 TRIM21 与 SLC7A11 的相互作用。
研究结果
1. NETs 参与肝 I/R 损伤
在小鼠肝 I/R 模型中，HE 染色显示肝组织出现显著损伤，血清 ALT、AST 水平大幅升高，TUNEL 染色证实肝细胞凋亡增加。Western blot 和免疫荧光检测发现，NETs 形成标志物 Cit-H3、PAD4、MPO 的表达显著上调，qPCR 显示炎症因子 IL-1β、IL-6、TNF-α 等水平升高。使用 DNase I 降解 NETs 后，上述损伤指标及炎症反应均明显减轻，表明 NETs 在肝 I/R 损伤中起关键推动作用。
2. 铁死亡诱导的 NETs 加剧肝 I/R 损伤
通过检测铁死亡相关指标发现，肝 I/R 损伤组小鼠肝组织中 MDA（脂质过氧化产物）水平升高，SOD、GSH（抗氧化物质）水平降低，铁代谢相关蛋白 SLC7A11、FTH1 及 GPX4 表达下调。给予铁死亡抑制剂 Fer-1 治疗后，氧化应激指标改善，SLC7A11、FTH1、GPX4 的表达恢复，提示铁死亡是 NETs 形成的重要诱因，二者共同加剧肝损伤。
3. TRIM21 促进铁死亡进程
研究发现，肝 I/R 损伤组和 OGD/R 细胞模型中 TRIM21 表达显著上调。敲低 TRIM21 后，MDA 水平下降，SOD、GSH 活性升高，SLC7A11、GPX4、FTH1 表达增加，表明 TRIM21 通过调控铁代谢和氧化应激促进铁死亡。
4. TRIM21 抑制可减少铁死亡诱导的 NETs 形成
在 OGD/R 模型中，敲低 TRIM21 可降低 ROS 含量，恢复抗氧化指标，并显著减少 Cit-H3、PAD4、MPO 的表达，说明 TRIM21 缺失能抑制铁死亡介导的 NETs 生成。体内实验进一步证实，AAV 介导的 TRIM21 基因沉默可改善肝组织病理结构，降低 ALT、AST 水平，减少炎症因子表达，减轻肝细胞凋亡。
5. TRIM21 通过泛素化 SLC7A11 调控铁死亡和 NETs
免疫荧光共定位和 Co-IP 实验证实 TRIM21 与 SLC7A11 存在直接相互作用，泛素化实验显示 TRIM21 可促进 SLC7A11 的泛素化降解。作为铁死亡关键蛋白，SLC7A11 的稳定性降低会加剧脂质过氧化，进而诱导 NETs 形成，而敲低 TRIM21 则通过稳定 SLC7A11 抑制这一恶性循环。
研究结论与意义
本研究首次揭示了 TRIM21 在出血性肝 I/R 损伤中的关键作用：TRIM21 作为 E3 泛素连接酶，通过泛素化降解 SLC7A11 蛋白，增强铁死亡诱导的 NETs 形成，从而加剧肝损伤。而敲低 TRIM21 可通过稳定 SLC7A11，抑制铁死亡和 NETs 生成，显著减轻肝 I/R 损伤。这一发现不仅阐明了肝 I/R 损伤中 TRIM21/SLC7A11 / 铁死亡 / NETs 的新调控通路，还为临床治疗出血性休克相关肝损伤提供了潜在靶点（如 TRIM21 抑制剂或 SLC7A11 激动剂），具有重要的转化医学意义。未来研究可进一步探索 TRIM21 抑制剂的体内安全性和有效性，推动其向临床应用的转化。
