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【编辑推荐】为解析圣奥古斯丁草抗旱分子机制,研究人员利用独立双亲群体验证抗旱相关 QTL,结合转录组分析差异表达基因。发现 24 个 QTL 及候选基因,涉及细胞壁组织等过程,为抗旱育种提供分子基础。
在全球水资源日益短缺的背景下,草坪草的抗旱性成为城市绿化与农业生产的关键挑战。圣奥古斯丁草(St. Augustinegrass)作为美国东南部广泛种植的暖季型草坪草,其抗旱性却相对较弱,而传统育种因缺乏对分子机制的深入理解进展缓慢。此前研究虽鉴定出多个抗旱相关数量性状基因座(QTL),但受限于低密度遗传图谱和环境影响,候选基因挖掘及标记辅助选择(MAS)应用受阻。因此,解析其抗旱的遗传基础与分子机制,成为突破育种瓶颈的关键。
为填补这一研究空白,美国北卡罗来纳州立大学(North Carolina State University)的研究团队开展了一项综合性研究。他们通过整合 QTL 定位与转录组分析,系统探究圣奥古斯丁草对水分胁迫的响应机制,相关成果发表在《BMC Plant Biology》。
研究采用的关键技术方法包括:①利用 XSA10098 与 XSA10127 杂交构建的伪 F?群体,通过 Illumina NovaSeq 测序进行基因分型,开发了包含 12,269 个单核苷酸多态性(SNP)标记的高密度连锁图谱,这是目前该物种密度最高的图谱;②在温室条件下进行两轮干旱胁迫试验,评估叶片萎蔫(LW)、绿色覆盖百分比(PGC)、相对含水量(RWC)等表型性状,并利用图像分析和曲线下面积(AUC)法量化胁迫进程;③对耐旱与敏感基因型进行转录组测序(RNA-Seq),结合基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析差异表达基因(DEGs);④通过整合 QTL 与转录组数据,筛选共定位的候选基因。
研究结果
1. 干旱相关性状的表型评估与 QTL 定位
两年温室试验表明,各表型性状在群体中呈现广泛变异和超亲分离。通过多 QTL 定位方法,共鉴定出 24 个 QTL,分布于 7 个连锁群(LG)。其中,连锁群 3、4、6、9 上的 QTL 与先前研究结果重叠,如 LG3 上的 QTL 与叶片萎蔫、绿色覆盖及恢复率等多个性状共定位,显示这些区域在抗旱性中具有重要作用。此外,同一连锁群上不同性状的 QTL 共定位现象(如 LG2 上的 PGC 与 AUPGCC)表明存在多效性或紧密连锁的遗传机制。
2. 转录组分析揭示基因型特异性响应机制
在敏感基因型中,干旱胁迫诱导 1965 个 DEGs(772 个上调,1193 个下调),而耐旱基因型中鉴定出 1005 个 DEGs(602 个上调,403 个下调)。GO 分析显示,耐旱基因型中脱落酸代谢、乙烯生物合成等胁迫响应过程显著富集,而敏感基因型中光合作用相关基因普遍下调。KEGG 通路分析发现,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在耐旱基因型中呈现上调与下调的动态平衡,而在敏感基因型中显著下调,提示其在信号传导中的关键作用。此外,淀粉与蔗糖代谢通路在敏感基因型中受损,可能影响渗透调节能力。
3. QTL 与转录组整合鉴定候选基因
通过共定位分析,在重叠 QTL 区域内筛选出 12 个 DEGs,涉及细胞壁组织(如内切葡聚糖酶)、光呼吸(丝氨酸羟甲基转移酶)、锌离子转运(锌转运蛋白)、活性氧(ROS)调控(富半胱氨酸跨膜蛋白)等多个生物学过程。例如,LG6 上的 LRR 受体样丝氨酸 / 苏氨酸蛋白激酶基因家族成员,可能通过脱落酸信号传导参与抗逆;LG9 上的锌转运蛋白基因在耐旱基因型中特异性表达,与玉米中耐旱相关的锌转运蛋白 4 功能一致。这些基因的表达模式差异表明,耐旱基因型通过维持细胞壁稳定性、增强离子平衡和抗氧化能力应对胁迫,而敏感基因型因相关通路基因下调导致胁迫响应缺陷。
结论与意义
本研究通过高密度连锁图谱构建、多环境 QTL 验证及转录组动态分析,系统揭示了圣奥古斯丁草抗旱性的遗传结构与分子网络。鉴定出的 QTL 重叠区域(如 LG3、9)和候选基因(如 LRR 激酶、锌转运蛋白)为标记辅助选择提供了可靠靶点,而转录组解析的 MAPK 信号通路与碳代谢调控机制,进一步阐明了耐旱性的关键调控节点。研究结果不仅为暖季型草坪草的抗旱育种提供了理论基础,也为禾本科植物的胁迫响应机制研究提供了跨物种参考。未来可通过功能验证与基因组编辑技术,加速抗旱品种的培育,助力节水型生态系统的构建。