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为解决趋化因子疗法 “脱靶毒性” 等问题，研究人员开展纳米颗粒共封装去甲斑蝥素前药（C12）与洛美他派（lomi）的研究。发现 NP“C12+lomi” 可抑制 Wnt/βcatenin通路、提升 CCL4 表达，增强免疫治疗效果，为安全调控趋化因子提供新策略。
论文解读
在肿瘤免疫治疗领域，趋化因子如 CCL4 虽能招募关键免疫细胞增强抗肿瘤响应，但直接给药存在半衰期短、“靶上脱瘤” 毒性等问题，限制了临床应用。而小分子免疫调节剂因稳定性高、免疫原性低等优势，成为潜在替代方案。研究表明，肿瘤内 Wnt/βcatenin通路激活与 CCL4 表达负相关，抑制该通路可能恢复 CCL4 表达、增强免疫细胞浸润，但如何安全高效地实现这一目标仍需探索。
在此背景下，天津中医药大学等机构的研究人员开展了相关研究，旨在开发一种基于纳米颗粒的协同递送系统，通过抑制 Wnt/βcatenin通路选择性恢复 CCL4 表达，以提升抗肿瘤免疫治疗效果。研究成果发表在《Journal of Nanobiotechnology》。
主要关键技术方法
- 纳米颗粒制备：采用高压均质法自组装制备 NP“C12+lomi”，将去甲斑蝥素前药（C12）与洛美他派（lomi）共封装于脂质纳米颗粒中，利用 RGD 肽修饰实现肿瘤靶向。
- 体外分析：通过 Western blot、qPCR、MTT 法等检测 βcatenin表达、CCL4 水平及细胞增殖情况；利用流式细胞术分析免疫细胞浸润。
- 体内实验：构建小鼠原位乳腺癌及术后转移模型，通过生物发光成像、组织学分析等评估肿瘤生长、转移及免疫响应；结合免疫检查点抑制剂 BMS1016 进行联合治疗研究。
研究结果
1. “NCTD + lomi” 协同诱导 CCL4 产生
在 4T1 细胞模型中，“NCTD + lomi” 组合连续处理四代后，显著降低活性 βcatenin水平，增加 E - 钙粘蛋白表达，使 CCL4 表达较单药提升 5 倍，抑制三维集落形成，提示其通过抑制 Wnt/βcatenin通路减少肿瘤干细胞特性、增强 CCL4 表达。
2. 去甲斑蝥素前药设计与评估
合成五种 NCTD 酯前药（C4-C12），通过分子对接、Western blot 等筛选出 C12，其脂溶性与 lomi 接近，与 PP2A 结合稳定，可在猫 hepsin B 作用下高效转化为 NCTD，体外抑制 βcatenin效果与 NCTD 相当，且细胞毒性低。
3. 纳米颗粒 “C12 + lomi” 的制备与表征
NP“C12 + lomi” 封装效率高（C12 98.22%，lomi 86.77%），粒径约 127.7 nm，稳定性良好。体外释放显示 C12 和 lomi 呈持续释放模式，且纳米颗粒解离后协同效应减弱，提示其通过共定位实现高效协同。
4. 体内抗肿瘤及免疫调节作用
在 4T1 原位肿瘤模型中，NP“C12 + lomi” 显著增加肿瘤、血液及肺转移灶中 CD8+T 细胞比例（约翻倍），延长小鼠中位生存期至 59 天。与免疫检查点抑制剂 BMS1016 联用，可进一步抑制肿瘤生长和肺转移，且无明显全身毒性。
5. 术后抗转移效果
在术后残留微肿瘤模型中，NP“C12 + lomi” 组小鼠肺转移结节显著减少，中位生存期较游离药物组延长 16 天，表明其通过增强 CD8+T 细胞浸润抑制转移，且静脉注射效果优于口服。
结论与讨论
本研究开发的 NP“C12 + lomi” 通过共封装小分子量药物，利用纳米颗粒的肿瘤靶向性和协同效应，实现了 Wnt/βcatenin通路的高效抑制及 CCL4 表达的精准调控，为解决趋化因子疗法的毒性问题提供了新策略。该系统结合了小分子的安全性和纳米递送的靶向性，不仅避免了 “靶上脱瘤” 毒性，还可与免疫检查点抑制剂联用，激活更强的抗肿瘤免疫响应。研究为小分子组合在肿瘤免疫治疗中的应用提供了范例，有望推动 “冷肿瘤” 向 “热肿瘤” 转化的临床实践，为转移性肿瘤的治疗开辟新方向。
