干扰素调节因子7（IRF7）重建恢复Huh7细胞中干扰素β诱导：肝病毒研究模型的关键突破

（编辑推荐）本研究通过RNA测序揭示Huh7肝癌细胞缺乏IRF7表达是干扰素β（IFN-β）诱导缺陷的核心机制，重建IRF7可恢复其与原发性人肝细胞（PHH）相当的先天免疫应答水平，为肝炎病毒研究提供了更生理相关的细胞模型。

　　

转录组分析揭示Huh7细胞的先天免疫缺陷
通过RNA测序比较Huh7、Huh7.5细胞与原发性人肝细胞（PHH）及永生化肝细胞PH5CH对双链RNA类似物poly(I:C)的响应，发现Huh7系列细胞虽能诱导干扰素刺激基因（ISGs），但几乎不产生IFN-β。关键差异在于IRF7的缺失——该转录因子在PHH和PH5CH中高表达，而在Huh7细胞中完全缺失。

IRF7重建恢复IFN-β诱导能力
通过慢病毒载体在Huh7.5-TLR3细胞中重建IRF7表达后，poly(I:C)转染可诱导IFN-β mRNA水平提升3个数量级，分泌量达PHH水平。有趣的是，IRF3过表达仅能部分补偿TLR3通路缺陷，而IRF7对RIG-I/MDA5通路激活的IFN-β诱导不可或缺。Western blot证实Huh7细胞天然缺乏IRF7蛋白，但具备正常IRF3和RIG-I表达。

病毒感染的验证实验
在仙台病毒（SeV）感染模型中，IRF7重建使Huh7.5细胞的IFN-β分泌量显著增加，并延迟性增强ISG（如IFITM1）表达。对于肝炎病毒，IRF7显著增强丁型肝炎病毒（HDV）感染的IFN-β应答，但对甲型（HAV）和丙型肝炎病毒（HCV）的IFN诱导无影响，这与临床研究中HCV弱诱导I型干扰素的观察一致。值得注意的是，HDV感染需共表达LGP2才能实现完全免疫激活。

机制深度解析
CRISPR-Cas9敲除实验显示，PH5CH细胞中IRF3缺失完全阻断IFN-β产生，而IRF7敲除无影响，表明不同肝细胞中IRF家族成员功能存在差异。在Huh7细胞中，IRF7的扩增作用不可替代——它通过正反馈循环（priming后自我诱导）大幅提升IFN-β应答幅度，而IRF3仅决定应答阈值。

模型应用价值
该研究建立的Huh7-IRF7模型填补了现有肝炎研究工具的空白：既保留了对所有肝炎病毒的易感性，又恢复了与生理状态匹配的先天免疫应答能力。尽管仍存在CCL8等细胞因子表达缺陷，但其在HDV和SeV感染中再现了PHH的干扰素特征，为研究肝病毒与宿主互作提供了更精准的平台。研究同时揭示了肝癌细胞中IRF7表观遗传沉默可能导致免疫逃逸的新线索。