中国海水养殖大黄鱼锥虫(Trypanosoma carassii spectrum)的鉴定及其跨盐度宿主适应性研究

本研究针对中国东南沿海网箱养殖大黄鱼爆发性锥虫病（累计死亡率达60%）开展病原学解析，通过显微形态学、分子系统发育分析和体外培养技术，首次证实典型淡水鱼类锥虫Trypanosoma carassii可感染海水鱼类，并命名为T. carassii spectrum新亚种。该发现突破了锥虫宿主特异性认知，为海水养殖病害防控提供新靶点。

　　

在中国东南沿海的网箱养殖场，一种神秘的疾病正在威胁着被称为"国鱼"的大黄鱼(Larimichthys crocea)。这种经济价值极高的海水鱼类近年来频繁出现异常死亡，养殖户们惊恐地发现，病鱼表现出贫血、肝脾病变等症状，每日死亡率高达1%，70天内累计损失近60%。更令人困惑的是，传统认知中淡水鱼类专属的锥虫病原体，竟在这场海洋鱼类疫情中扮演着关键角色。

中山大学的研究团队在《Aquaculture Reports》发表的这项研究，揭开了这场疫情背后的科学谜团。研究人员从福建宁德三都澳湾的发病渔场采集样本，通过整合显微观察、PCR检测、多基因系统发育分析和电子显微镜技术，首次证实引发大黄鱼疫情的病原体属于淡水锥虫Trypanosoma carassii复合群C组，并因其独特的宿主谱将其命名为T. carassii spectrum亚种。研究还成功建立SDM79培养基体外培养体系，为后续防控研究奠定基础。

主要技术方法
研究采用感染大黄鱼血样进行Giemsa染色形态测量，通过18S rDNA、ITS1和GAPDH基因测序进行分子鉴定；使用MAFFT和FastTree2构建系统发育树；以尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)、锦鲤(Cyprinus carpio)和加州鲈(Micropterus salmoides)建立感染模型；采用扫描/透射电镜观察超微结构。

研究结果
3.1 大黄鱼锥虫病的临床表现
疫情爆发期间采集的11尾病鱼中，54.5%镜检阳性，最高虫体密度达10⁹/mL。病理解剖显示典型脾脏黑变、肝脏苍白等病变特征，18S rDNA序列与淡水T. carassii MARV株相似度达99.27%。

3.2 系统发育分析
多基因进化树显示分离株明确聚类于T. carassii复合群C组，18S rDNA遗传距离仅0.002-0.006，ITS1扩增片段400bp的特征与C组完全一致。

3.3 形态学特征
Giemsa染色显示虫体为典型锥鞭毛体(trypomastigote)，平均体长31.8μm，鞭毛指数0.7。电镜观察到鞭毛袋(flagellar pocket)和波动膜(undulating membrane)等典型结构，但体宽显著大于淡水分离株。

3.4 宿主范围实验
人工感染证实该虫株可跨盐度感染三种淡水鱼类：尼罗罗非鱼5-7天出现虫血症，加州鲈感染率达100%且峰值密度达2×10⁹/mL，显示极强的宿主适应性。

3.5 体外培养
在SDM79培养基中实现6倍增殖，接种密度5×10⁵/mL时第9天达6×10⁶/mL，成功建立12个克隆株。

结论与意义
这项研究首次报道淡水T. carassii锥虫感染海水鱼类的现象，打破了"盐度屏障"的传统认知。命名的新亚种T. carassii spectrum具有三大突破性特征：(1)首例海水鱼类感染的T. carassii株系；(2)展现更广的宿主谱；(3)维持高致病性（虫血症密度达10⁸-10⁹/mL）。

讨论部分指出，该发现可能改写鱼类锥虫的传播生态学：通过尼罗罗非鱼等广盐性鱼类的"桥梁作用"，淡水锥虫可经水蛭等媒介跨盐度传播。研究建议重点关注：(1)海洋水蛭的媒介作用验证；(2)养殖区野生鱼类作为潜在保虫宿主；(3)开发基于SDM79培养体系的药物筛选平台。

该成果为海水养殖业锥虫病防控提供全新视角，尤其对混合养殖模式下的交叉感染风险发出预警。未来需开展全基因组测序以明确其盐度适应机制，并建立基于媒介阻断的生态防控策略，保障我国年产量28万吨的大黄鱼养殖产业可持续发展。