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飞蝗孔道蛋白Snsl在表皮脂质运输及屏障功能中的关键作用
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年05月27日 来源:Insect Biochemistry and Molecular Biology 3.2
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本研究针对昆虫表皮脂质运输机制不明的问题,通过RNA干扰技术沉默飞蝗(Locusta migratoria)的孔道蛋白基因LmSnsl,揭示了其对脂质运输、孔道结构完整性及表皮屏障功能的关键作用。研究发现,LmSnsl缺失导致脂质沉积异常、孔道变形,并显著增加杀虫剂和病原体的易感性,为昆虫表皮屏障的分子机制提供了新见解。
昆虫表皮是抵御外界环境威胁的第一道防线,其表面的脂质层对防止水分流失、阻挡病原体和杀虫剂渗透至关重要。然而,脂质如何从合成部位运输至表皮表面的分子机制尚不明确。飞蝗作为典型的农业害虫,其表皮屏障功能的研究不仅具有理论意义,还为开发新型害虫防控策略提供了潜在靶点。
山西大学的研究团队在《Insect Biochemistry and Molecular Biology》发表论文,首次在飞蝗中鉴定了孔道蛋白LmSnsl,并系统解析了其在脂质运输和表皮屏障构建中的功能。通过转录组分析、RNA干扰(RNAi)、脂质组学和超微结构观察等技术,研究发现LmSnsl特异性表达于体壁,且在蜕皮前高表达。沉默LmSnsl导致飞蝗蜕皮障碍甚至死亡,同时伴随表皮脂质减少、内部脂质堆积以及孔道结构变形。进一步实验表明,LmSnsl缺失会增强角质层对杀虫剂的渗透性,并促进病原真菌附着,证实其双重屏障功能。
关键实验方法
研究基于飞蝗转录组数据库筛选LmSnsl基因,通过qPCR分析其时空表达模式;利用RNAi沉默基因后观察表型;采用气相色谱-质谱(GC-MS)检测脂质组成变化;结合透射电镜(TEM)和Sudan black B染色分析孔道结构;通过杀虫剂渗透实验和病原体侵染实验评估屏障功能。
研究结果
LmSnsl的鉴定与表达特征
生物信息学分析显示LmSnsl编码177个氨基酸的分泌蛋白,与果蝇Snsl同源性为41%。其在体壁高表达,蜕皮前表达峰值提示其参与新表皮形成。
LmSnsl缺失导致发育障碍
RNAi沉默后,飞蝗因蜕皮失败死亡,表明LmSnsl为蜕皮必需基因。
脂质运输与孔道结构异常
沉默组表皮烃类(CHCs)减少50%,内部脂质堆积;TEM显示孔道管腔物质减少且结构扭曲,证实LmSnsl维持孔道完整性以运输脂质。
屏障功能破坏
dsLmSnsl若虫对杀虫剂(如拟除虫菊酯)的敏感性提高2倍,且更易被绿僵菌侵染,揭示脂质层对化学和生物屏障的双重作用。
结论与意义
该研究阐明LmSnsl通过维持孔道结构介导脂质运输,是飞蝗表皮屏障构建的核心分子。其功能保守性(如与果蝇Snsl相似)提示孔道蛋白在节肢动物中的普适性机制。成果不仅填补了昆虫脂质运输分子机制的空白,还为针对表皮屏障的害虫防控(如协同增效杀虫剂)提供了新思路。此外,LmSnsl介导的病原体防御途径可能启发新型抗感染策略。
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