《Ancylobacter sp. BL1降解1,2-二氯乙烷的分子机制及污染土壤生物强化修复应用》

【字体: 时间:2025年05月27日 来源:International Biodeterioration & Biodegradation 4.1

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  针对1,2-二氯乙烷(1,2-DCA)污染土壤修复难题,研究人员从污染土壤中分离出高效降解菌株Ancylobacter sp. BL1,解析其水解脱卤代谢通路及关键基因(dhlA/dhlB/max/ald),首次实现实际污染土壤中86%的1,2-DCA(235 mg/kg)5日内降解,且不破坏土著微生物群落。该研究为氯代烃污染生物修复提供了新菌种资源和理论支撑。

  

1,2-二氯乙烷(1,2-DCA)作为聚氯乙烯生产的关键原料,全球年产量超1500万吨,其持久性污染可导致土壤生态破坏和动物脑水肿等病理损伤。尽管催化氧化等传统修复技术存在二次污染风险,但针对土壤1,2-DCA污染的生物修复研究仍属空白。更棘手的是,现有降解菌株如Xanthobacter autotrophicus GJ10虽已知代谢通路,但其在实际污染场地的应用效果及对微生态的影响从未验证。

为突破这一瓶颈,中国某研究机构团队从污染土壤中分离出一株新型1,2-DCA降解菌,经16S rRNA鉴定为Ancylobacter sp. BL1。通过响应面法优化降解条件,结合GC-MS和全基因组测序技术,首次揭示该菌株通过水解脱卤途径降解1,2-DCA的分子机制。引人注目的是,关键基因dhlA与dhlB共存于一个大质粒上,这与经典模型菌株GJ10的基因分布模式显著不同。在实际土壤修复实验中,BL1菌株5日内降解率达86%,且显著提升了有机碳降解相关菌群的丰度,同步恢复了土壤酶活性。该成果发表于《International Biodeterioration》。

关键技术方法包括:BTB显色法筛选降解菌、响应面法(RSM)优化降解条件、气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析代谢产物、Illumina全基因组测序解析降解基因簇、高通量测序监测土壤微生物群落变化。

研究结果:

  1. 菌株分离与鉴定
    通过BTB显色法从污染土壤分离出BL1菌株,电镜显示其为短杆状革兰氏阴性菌,16S rRNA序列同源性证实属于Ancylobacter属。

  2. 降解特性与动力学
    在30°C、pH 7.0和1% NaCl条件下,BL1对300 mg/L 1,2-DCA的36小时降解率达98%。动力学分析符合一级反应模型。

  3. 代谢通路解析
    检测到氯乙醇和氯乙醛中间产物,证实其通过水解脱卤途径逐步转化为乙二醇。全基因组发现dhlA(编码卤代烷脱卤酶)与dhlB(卤代醇脱氢酶)位于同一质粒,而max(单加氧酶)和ald(醛脱氢酶)位于染色体。

  4. 土壤修复应用
    接种BL1使污染土壤(235 mg/kg 1,2-DCA)5日内降解率提升至86%,且未显著改变α-多样性指数。值得注意的是,Sphingomonas等有益菌群丰度增加,脱氢酶和脲酶活性恢复至清洁土壤水平。

结论与意义:
该研究首次将Ancylobacter sp. BL1成功应用于实际1,2-DCA污染土壤修复,其独特的水解脱卤机制和质粒携带的dhlAB基因簇为定向改造工程菌提供了新靶点。研究证实生物强化技术既能高效去除污染物,又可维持土壤微生态平衡,这对发展绿色可持续的氯代烃污染修复策略具有里程碑意义。未来研究可聚焦于dhlAB质粒的水平转移潜力及其在复杂污染物共代谢中的应用价值。

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