靶向CD39通过增强CD8+TILs功能与招募B细胞协同PD-1阻断治疗宫颈癌的"一石二鸟"策略

本研究针对PD-1阻断治疗复发转移性宫颈癌(CC)客观缓解率(ORR)低的问题，通过单细胞RNA测序(scRNA-seq)发现CD39在耗竭性CD8+T细胞中高表达。研究人员开发了POM-1脂质体(POM-1/Lip)，证实CD39抑制能增强CD8+TILs细胞毒性并通过CXCL13-CXCR5轴招募B细胞，显著提升PD-1阻断疗效。该研究为克服免疫检查点阻断(ICBs)耐药提供了创新组合策略。

　　

宫颈癌作为女性第四大癌症死因，尽管HPV疫苗和筛查手段普及，晚期患者5年生存率仍不足20%。PD-1抑制剂虽被批准用于复发转移性宫颈癌，但客观缓解率(ORR)仅14.6-17%，亟需破解免疫治疗耐药难题。传统观点认为免疫治疗失败源于"冷肿瘤"微环境，但如何精准调控免疫细胞亚群仍是未解之谜。

复旦大学附属妇产科医院联合同济大学的研究团队在《Journal of Nanobiotechnology》发表突破性成果。通过单细胞测序技术发现CD39是宫颈癌耗竭性CD8⁺T细胞的关键标志物，创新性开发脂质体包裹的CD39抑制剂POM-1/Lip，证实其能通过"双管齐下"机制——既增强CD8⁺TILs功能又招募B细胞，显著提升PD-1阻断疗效。

研究采用多组学技术联用的策略：首先对10例患者组织进行scRNA-seq解析T细胞异质性；通过87例临床样本免疫荧光和TCGA数据库验证CD39的预后价值；建立TC-1小鼠模型评估体内疗效；开发POM-1/Lip纳米递送系统解决药物毒性问题；采用流式细胞术和ELISA检测免疫细胞动态变化。

CD39⁺CD8⁺T细胞在CC微环境中呈现免疫耗竭和克隆增殖
scRNA-seq揭示CD39⁺CD8⁺T细胞高表达PD-1、CTLA4等抑制性受体，低表达IFN-γ等效应分子。伪时序分析显示该亚群分化程度更高，KEGG富集提示其与B细胞受体通路激活相关。流式验证显示CD39⁺细胞增殖标志物Ki67⁺比例达32.5%，显著高于CD39^-群体(15.8%)。

CD39在CD8⁺TILs中高表达与CC进展和不良预后相关
免疫荧光显示晚期(FIGO III-IV)患者CD39⁺CD8⁺T细胞比例较早期高2.3倍。生存分析表明，CD39^hi患者5年生存率仅41.7%，显著低于CD39^low组(72.3%)。多因素Cox回归证实CD39^hi是独立危险因素(HR=2.16, P=0.008)。

CD39抑制联合PD-1阻断增强CD8⁺TILs功能
离体实验显示联合治疗使肿瘤细胞晚期凋亡率提升至38.4%，显著高于单药组(P<0.001)。小鼠模型中联合组肿瘤体积缩小67.2%，Ki67⁺细胞减少54.3%。流式检测显示联合组CD107A⁺CD8⁺T细胞比例达29.7%，是对照组的3.1倍。

POM-1/Lip的制备与特性表征
脂质体粒径148.55 nm，Zeta电位-0.5956 mV，载药量47.5%。体内分布显示肿瘤蓄积量是游离药物的4.3倍。酶活检测证实其可持续抑制CD39活性达48小时，使ATP水平提升2.8倍(P=0.027)。

该研究创新性地揭示了CD39调控宫颈癌免疫微环境的双重机制：一方面通过腺苷通路诱导T细胞耗竭，另一方面通过CXCL13-CXCR5轴调控B细胞募集。所开发的POM-1/Lip纳米制剂克服了传统CD39抑制剂的血管毒性，为临床转化提供新思路。研究首次将B细胞招募机制纳入CD39靶向治疗的理论框架，为"冷肿瘤"免疫治疗提供了组合策略。这些发现不仅适用于宫颈癌，对PD-1耐药的其他实体瘤治疗也有重要借鉴意义。