仿生纳米复合物负载Evolocumab和姜黄素协同抗动脉粥样硬化治疗：基于ApoE-/-小鼠的多靶点调控策略

本研究针对动脉粥样硬化（AS）中炎症与脂代谢紊乱的双重病理机制，开发了兼具巨噬细胞膜伪装和透明质酸修饰的双载药纳米系统HA-M@P@(Evol+Cur) NPs。通过同步递送PCSK9抑制剂Evolocumab（Evol）与天然抗炎剂姜黄素（Cur），实现了斑块局部抗炎与肝脏系统性脂代谢调节的协同作用，显著减少ApoE-/-小鼠斑块面积并增强稳定性，为AS临床治疗提供了创新方案。

　　

动脉粥样硬化（Atherosclerosis, AS）是全球心血管疾病死亡的首要诱因，其核心病理特征是慢性炎症与脂质代谢失衡的"恶性循环"。尽管现有降脂疗法（如他汀类）能降低低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C），但约75%心血管事件仍伴随炎症反应，单一靶点干预效果有限。更棘手的是，高同型半胱氨酸（Hcy）血症会同时加剧巨噬细胞脂质蓄积和肝脏代谢紊乱，形成"斑块-肝脏"双向恶化机制。如何打破这种病理循环，成为AS治疗领域亟待突破的科学难题。

宁夏医科大学的研究团队在《Journal of Nanobiotechnology》发表了一项突破性研究，设计出仿生纳米复合物HA-M@P@(Evol+Cur) NPs。该系统通过巨噬细胞膜（Mom）伪装实现免疫逃逸，并利用透明质酸（HA）靶向斑块中CD44⁺巨噬细胞，同步递送降脂药Evolocumab（PCSK9抑制剂）和抗炎姜黄素。研究首次证实该纳米系统可同时调控斑块局部ABC转运体（ABCA1/ABCG1）介导的胆固醇外流和肝脏LDLR（低密度脂蛋白受体）循环利用，实现"双靶点-双器官"协同治疗。

关键技术方法包括：1）通过膜蛋白融合技术构建巨噬细胞膜包被的PLGA纳米粒；2）透明质酸-PEG₂₀₀₀-DSPE靶向分子修饰；3）ApoE^-/-小鼠高蛋氨酸饮食诱导AS模型；4）激光共聚焦与流式细胞术分析纳米粒靶向性；5）代谢组学与16S rRNA测序评估肝脏代谢及肠道菌群调控。

协同效应验证
体外实验显示，Evol（1.25 nM）与Cur（10 μM）联用使巨噬细胞胆固醇外流效率提升2.6倍，同时下调促炎因子TNF-α/IL-1β达68%，并上调肝细胞LDLR表达31.3%。这为纳米系统设计提供了药效学基础。

纳米系统构建
透射电镜显示HA-M@P@(Evol+Cur) NPs具有216.5 nm粒径和11 nm膜涂层（图2B）。胆固醇微环境触发药物释放，在含0.5 mg/mL胆固醇的PBS中，Evol和Cur的60小时累积释放率分别达68.6%和51%（图2I-J）。CD44受体阻断实验证实HA修饰使纳米粒对活化巨噬细胞的摄取率提升至91.1%（图3C）。

斑块治疗机制
在ApoE^-/-小鼠中，纳米治疗组斑块面积减少61.2%（图7F-G），胶原含量增加2.1倍（图7J-K）。机制上：1）通过上调ABCA1/ABCG1（图4E）促进巨噬细胞胆固醇外流；2）抑制JAK2/STAT3磷酸化（图8E-F）使M1型巨噬细胞（CD86⁺）比例从35.6%降至18.8%（图4J）；3）降低斑块MMP-9表达43%（图7L-M）。

肝脏代谢调控
纳米治疗使肝脏甘油三酯（TG）和总胆固醇（TC）分别降低30%/52%（图S10）。免疫组化显示其通过抑制PCSK9（图9D）促进LDLR循环，同时上调肝组织ABCA1/ABCG1（图S11A-B）。代谢组学发现该纳米系统可纠正Hcy诱导的甘油磷脂代谢紊乱，提升抗炎介质花生四烯酸水平达2.3倍（图9G）。

肠道菌群干预
16S rRNA测序表明纳米治疗使Firmicutes/Bacteroidetes比值降低64%（图9I-J），促炎菌属Desulfovibrio减少，而产丁酸盐的Lachnospiraceae_NK4A136_增加（图S16A）。

这项研究开创性地提出"炎症-代谢"双轨调控策略，其重要意义在于：1）首次实现AS治疗中斑块微环境重塑与系统性代谢调控的时空协同；2）为多靶点纳米药物设计提供模板——通过膜伪装延长半衰期（2.457小时，图6B），借助HA-CD44轴提升斑块靶向性（主动脉荧光强度增加3倍，图6C）；3）揭示Hcy通过干扰"肝脏-斑块"代谢对话加剧AS的新机制。该成果为临床开发AS联合疗法提供了理论依据和技术储备。