巨胞饮体介导HIV-1进入原代CD4+ T细胞的关键机制及其抗病毒治疗潜力

（编辑推荐）本研究首次揭示HIV-1通过巨胞饮作用（macropinocytosis）进入原代CD4+ T细胞的分子机制。通过SOS Env病毒模型和显微成像技术，证实HIV-1可在巨胞饮体（macropinosomes）膜上发生融合，且巨胞饮抑制剂EIPA能显著抑制病毒内化、融合及感染。该发现为靶向宿主细胞 entry pathway 的抗HIV策略提供了新思路。

　　

研究背景

HIV-1进入靶细胞的路径长期存在争议，尤其在原代CD4⁺
T细胞（主要宿主细胞）中，病毒究竟通过质膜还是内体途径进入尚未明确。既往研究表明，HIV-1可在中性pH条件下融合，暗示内体酸化非必需，但温度敏感性实验又提示内吞作用参与其中。巨胞饮作用作为一种依赖肌动蛋白的大规模内吞形式，在巨噬细胞和癌细胞中已被证实介导病毒进入，但其在原代CD4⁺
T细胞中的作用未被探索。

研究方法与发现

HIV-1通过巨胞饮体进入原代CD4⁺

T细胞
研究团队利用工程化SOS Env病毒（含gp120-gp41二硫键）结合膜不通透融合抑制剂T-20，发现HIV-1在原代CD4⁺
T细胞中可通过质膜和内体（37°C形成）双重途径进入，而T细胞系（A3.01和Jurkat）仅依赖质膜途径。通过特异性抑制剂EIPA和J/B（jasplakinolide/blebbistatin）处理，证实巨胞饮抑制可减少病毒内化（NanoLuc标记实验显示降低30-50%）及融合（BlaM-Vpr实验显示抑制50%）。

显微成像验证病毒-巨胞饮体共定位

双荧光标记（Gag-iVenus/mScarlet-Vpr）的HIV-1与BSA-AlexaFluor647共定位分析显示，约55%病毒颗粒进入巨胞饮体，且EIPA处理显著降低共定位率。进一步通过MA-3xHA标记技术，首次捕捉到HIV-1在完整巨胞饮体膜上的融合事件（T-20敏感），证实巨胞饮体是功能性融合位点。

巨胞饮抑制剂的抗病毒效应

EIPA通过阻断mTORC1活性（S6蛋白磷酸化降低）和病毒进入双重机制抑制感染，但对T细胞系无效。值得注意的是，AZD2014（mTOR抑制剂）仅轻微影响感染，提示EIPA的抗病毒作用主要源于对entry步骤的干扰。

机制探讨与意义

研究揭示了温度敏感性的关键矛盾：22°C时巨胞饮失活而其他内吞途径持续，解释了既往关于HIV-1进入位点的争议。此外，巨胞饮体可能富集CD4/CCR5/CXCR4等受体，或排除干扰素诱导跨膜蛋白（IFITM）等抗病毒因子，为病毒创造有利环境。

应用前景

该研究不仅阐明原代CD4⁺
T细胞特异性依赖巨胞饮的分子基础，还为开发靶向宿主内吞途径的抗HIV药物提供了理论依据。未来需进一步解析巨胞饮体膜蛋白组成及其与病毒协同进化的关系。