揭示隐匿型α-地中海贫血：突尼斯家族中HBA1基因新型缺失与错义突变的特征解析及其临床意义

这篇研究通过综合临床评估、分子检测和计算机模拟（in silico）分析，首次报道了突尼斯人群HBA1基因的230 bp微缺失（命名为Hb Ariana）和错义突变p.Ala29Pro（命名为Hb Tozeur）。研究揭示了α-地中海贫血（α-thal）的基因型-表型异质性，强调全面基因筛查对鉴别诊断（如与缺铁性贫血IDA的区分）和遗传咨询的重要性，为地中海地区血红蛋白病（hemoglobinopathy）的精准管理提供新依据。

　　

揭示隐匿型α-地中海贫血的分子机制

Abstract
α-地中海贫血作为最常见的遗传性血红蛋白病之一，主要由HBA1和/或HBA2基因缺失或点突变引起。本研究在突尼斯家族中发现两种新型HBA1突变：230 bp微缺失（NC_000016.10:g.176695_176925del）和错义突变（NM_000558.5:c.85G>C，NP_000549.1:p.Ala29Pro），分别命名为血红蛋白Ariana（Hb Ariana）和血红蛋白Tozeur（Hb Tozeur）。通过整合临床数据、分子检测和结构模拟，揭示了这些突变对α-珠蛋白链合成的破坏机制及其临床意义。

Introduction
α-地中海贫血的临床表型谱从无症状携带者到致死性胎儿水肿（Hb Bart's hydrops fetalis），取决于功能性α-珠蛋白基因的数量。地中海地区高发的-α^3.7
缺失和poly A信号突变占主导，但非缺失型突变（如本研究发现的p.Ala29Pro）通过影响蛋白质稳定性加剧表型异质性。

Materials and methods
研究采用自动化血细胞分析（Sysmex XS-1000i）和高性能液相色谱（HPLC）评估血液学参数，通过缺口PCR（gap-PCR）筛查常见缺失，阴性样本进行HBA1/HBA2外显子测序。利用PolyPhen-2、SIFT等工具预测错义突变致病性，Swiss-PdbViewer和DynaMut模拟蛋白质构象变化。

Results
临床特征

• 家族A中4岁先证者表现为铁剂无效的轻度贫血（Hb 11 g/dL，MCV 64 fL），父亲携带相同缺失但表型轻微（HbA2 2.5%）。
• 家族B中4月龄婴儿合并α-thal与血红蛋白C（HbC 27%），父亲携带相同p.Ala29Pro突变。

分子特征

• Hb Ariana缺失覆盖5'UTR、外显子1及部分内含子1，侧翼存在TCCCC重复序列提示不等交换机制。
• Hb Tozeur的p.Ala29Pro位于α-螺旋核心区，计算机模拟显示其破坏氢键网络（ΔΔG -0.328 kcal/mol），导致血红素结合区构象紊乱。

Discussion

• 隐匿型α-thal易被误诊为IDA：家族A先证者的铁剂无效性贫血凸显基因检测的必要性。
• 结构生物学启示：p.Ala29Pro通过引入脯氨酸的刚性环（helix-breaking效应）破坏α-螺旋，而同一位置已报道的p.Ala29Val（Hb Nedlands）因理化性质相似无临床影响，印证突变位点特异性。
• 临床管理意义：Hb C与α-thal共遗传可能减轻溶血表现，需通过血红蛋白电泳与基因检测明确诊断。

Conclusion
本研究拓展了对α-thal分子基础的认识，强调整合多组学方法（从gap-PCR到动态突变分析）在罕见变异解读中的价值，为地中海地区血红蛋白病的精准防控提供分子标志物。