双峰驼血浆外泌体分离提取及肝癌细胞对外泌体摄取的实验研究

　　 摘要:

为进一步研究双峰驼(Camelus bactrianus)血浆来源的外泌体在肝癌细胞侵袭和转移中的调节作用，本研究采用超速离心法分离双峰驼血浆外泌体，并通过透射电镜观察其形态和超微结构。随后，使用纳米粒子跟踪分析仪测定外泌体的粒径及分布。将荧光染料PKH67标记的外泌体与肝癌细胞(MHCC-97H和Huh7细胞)共培养，并应用扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察肝癌细胞对双峰驼血浆来源外泌体的摄取情况。结果显示，分离获得的双峰驼血浆外泌体均呈现杯状或圆形形态，直径约为100 nm；纳米粒子跟踪分析的结果表明，其颗粒大小的主峰分别为约124.6 nm和117.9 nm，总体尺寸分布范围从50 nm到200 nm。在扫描共聚焦显微镜下观察，PKH67标记的外泌体能够进入MHCC-97H和Huh7肝癌细胞内，且主要分布于细胞膜及核周的细胞质中。本研究成功提取了双峰驼血浆外泌体，并观察到肝癌细胞对外泌体的摄取现象，表明肝癌细胞可能是双峰驼外泌体的靶细胞之一。