碱盐胁迫下狗牙根根系qRT-PCR内参基因的筛选与验证研究

为解决碱盐胁迫下狗牙根(Cynodon dactylon)根系基因表达分析中内参基因稳定性不足的问题，研究人员通过geNorm、NormFinder等工具系统评估EF1α、TIP41等7个候选基因，最终确定EF1α为最稳定内参，为植物逆境分子机制研究提供关键技术支撑。

　　

实时荧光定量PCR(qRT-PCR)作为基因表达分析的黄金标准，其数据可靠性高度依赖于内参基因的选择。面对碱性盐胁迫这一特殊环境压力，科研团队以狗牙根(Cynodon dactylon)根系为研究对象，展开了一场精密的"基因稳定性选拔赛"。

候选阵容包含EF1α、PP2A、TIP41等7个经典管家基因，研究人员运用geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder四套评估系统，从引物特异性、扩增效率到表达稳定性进行多维考核。琼脂糖凝胶电泳显示清晰的单一条带，熔解曲线呈现完美单峰，这些实验证据为后续分析奠定质量基础。

ΔCt值初步筛选显示EF1α、TIP41和GAPDH表现优异，而综合四大软件的分析结果一致将EF1α推上冠军宝座。为验证这一发现，团队巧妙结合转录组数据和核心基因qRT-PCR验证，最终确认EF1α在碱盐胁迫条件下具有卓越的表达稳定性。

这项研究不仅为狗牙根逆境生物学研究提供了可靠的内参选择方案，更通过系统性的评估方法，为其他非模式植物的基因表达研究树立了技术范本。当植物根系遭遇盐碱"围攻"时，EF1α就像一把精准的分子标尺，帮助科学家们丈量基因表达的细微变化，揭示植物适应逆境的奥秘。