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链霉菌Streptomyces lividans和S. rochei的分离鉴定及其对Rhizoctonia solani引起根腐病的生物防治潜力研究
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年06月18日 来源:Egyptian Journal of Biological Pest Control 2.1
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本研究针对土传病原真菌Rhizoctonia solani引起的作物根腐病问题,通过分离筛选具有生防潜力的链霉菌菌株,优化其培养条件并验证温室防治效果。研究人员从埃及不同地区的植物根际分离到两株高效拮抗菌AC82(Streptomyces lividans)和AC143(S. rochei),其通过分泌细胞壁降解酶(如几丁质酶、蛋白酶)和挥发性有机物(VOCs)抑制病原菌生长。通过单因素和响应面法(RSM)优化发现,以糖蜜(molasses)和玉米浆(CSL)为低成本培养基成分时,抑菌活性分别提升53%和68%。温室试验证实发酵液可使菜豆幼苗存活率从25-30%提升至75-80%,为绿色防控提供了新策略。
研究背景与意义
Rhizoctonia solani(立枯丝核菌)是威胁全球农业生产的土传病原真菌,可导致大豆、小麦、番茄等20-40%的产量损失。其形成的抗性菌核(sclerotia)能在恶劣环境中长期存活,传统化学杀菌剂易引发环境污染和病原菌耐药性。尽管抗病品种是理想解决方案,但育种周期长且病原菌变异快,因此微生物防治成为研究热点。链霉菌(Streptomyces)作为天然抗生素的主要生产者,75%的农用抗菌物质源自该属,但其在R. solani防控中的应用潜力尚未充分挖掘。
研究机构与方法
开罗大学农学院微生物系联合埃及农业研究中心的研究团队,从埃及4个省份的根际土壤中分离85株放线菌,通过双重培养法筛选出抑菌率超50%的S. lividans AC82和S. rochei AC143。研究结合形态学、生化特征和16S rRNA基因测序(登录号OQ519844/OQ519886)完成菌种鉴定,利用光学/扫描电镜(SEM)观察菌丝畸变,并通过Plackett-Burman设计(PBD)和Box-Behnken响应面法(BBD)优化培养参数。温室试验以菜豆(Phaseolus vulgaris)为模型,评估发酵液对根腐病的防治效果。
主要结果
1. 拮抗机制解析
双重培养显示两株菌对R. solani抑菌率达64.71%(S. lividans)和63.53%(S. rochei)。SEM图像揭示链霉菌能穿透病原菌菌丝,导致细胞壁穿孔(图5b/c)和顶端萎缩。酶活性检测证实其分泌几丁质酶、蛋白酶等细胞壁降解酶(图6),且挥发性有机物(VOCs)抑菌效果达67.10%。
2. 低成本培养基优化
单因素试验确定糖蜜(2-2.5%)和玉米浆(CSL)为最佳碳氮源。RSM模型(R2
0.99)显示S. lividans在25 ml/L糖蜜+5 ml/L CSL+3天菌龄时抑菌率提升至92%,较基础培养基提高53%。
3. 温室验证
优化培养基发酵液处理使菜豆幼苗存活率从对照组的25-30%升至80%(S. lividans)和75%(S. rochei),显著降低猝倒病发生率(图9)。
结论与意义
该研究首次报道S. lividans对R. solani的生防潜力,并创新性利用工农业副产品糖蜜和CSL降低成本。通过多组学手段阐明其通过酶解和VOCs的多重拮抗机制,为开发稳定、经济的生物农药提供了理论依据。研究成果发表于《Egyptian Journal of Biological Pest Control》,对减少化学农药依赖、推动可持续农业具有重要实践价值。
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