AAV8载体介导的SARS-CoV-2、RSV和流感抗体联合递送：为免疫缺陷人群提供长效广谱呼吸道病毒防护新策略

免疫缺陷患者面临SARS-CoV-2、RSV和流感病毒感染的高风险，但疫苗应答率低。本研究通过AAV8载体肌肉注射递送三种单抗（A23.58.1、Nirsevimab和1000-3B04），实现长效抗体表达，为免疫缺陷人群提供“一针式”广谱防护方案，发表于《Virology》。

　　

季节性呼吸道病毒感染一直是全球公共卫生的重大挑战，尤其是SARS-CoV-2、呼吸道合胞病毒(RSV)和流感病毒，每年导致大量住院和死亡病例。对于免疫缺陷人群——包括血液系统恶性肿瘤患者、器官移植受者和先天性免疫缺陷者——这些病毒更是致命的威胁。更棘手的是，这类人群对疫苗的免疫应答率显著低于健康人群，使得他们难以通过常规疫苗接种获得有效保护。目前，单克隆抗体(mAbs)被动免疫疗法虽能提供即时防护，但需要频繁注射且成本高昂，限制了其广泛应用。

针对这一临床困境，丹麦奥胡斯大学的研究团队创新性地提出利用腺相关病毒8型(AAV8)载体实现长效抗体表达的解决方案。他们通过肌肉注射递送编码三种抗病毒单抗的AAV8载体——抗SARS-CoV-2的A23.58.1、抗RSV的Nirsevimab和抗流感的1000-3B04，在小鼠模型中成功实现了长达数月的抗体表达，相关成果发表在《Virology》期刊。

研究团队采用Western blot验证抗体表达，通过体外中和实验评估抗体活性，并建立小鼠感染模型评估保护效果。所有实验动物均来自奥胡斯大学生物医学系动物设施，研究方案经丹麦动物实验伦理委员会批准。

AAV设计
研究团队构建了四种AAV8载体：一种携带NanoLuciferase(NLuc)和eGFP的报告基因载体用于评估转导效率，另外三种分别编码三种治疗性单抗。抗体基因采用CAG或EF1α启动子驱动，通过F2A肽链连接重链和轻链序列，末端添加牛生长激素polyA信号。

Construction and expression validation of AAV8 vectors
Western blot证实所有质粒均能正确表达抗体重链和轻链。体外实验显示，AAV8转导的细胞上清具有中和病毒活性，其中A23.58.1对SARS-CoV-2的中和效价达到临床相关水平。

Discussion
该研究首次证明AAV8可同时递送三种抗病毒单抗，且表达水平足以提供保护。肌肉注射途径使抗体在局部持续产生，避免了静脉注射的峰谷效应。更重要的是，这种方法突破了免疫系统限制，使抗体表达不依赖于宿主免疫功能状态。

这项研究的突破性意义在于：1)为免疫缺陷人群提供了“一针管数月”的防护方案；2)首次实现三种呼吸道病毒抗体的联合递送；3)为开发广谱抗病毒基因疗法奠定基础。未来研究可进一步优化载体设计以提高表达效率，并探索其他AAV血清型在不同组织的靶向性。该技术路线不仅适用于呼吸道病毒防护，还可拓展至其他需要长期被动免疫的感染性疾病领域。