环状RNA circFKBP8(5S,6)编码蛋白通过抑制DRD3/AMPK/mTOR/ULK1自噬通路促进小鼠应激易感性的机制研究

本研究揭示了环状RNA circFKBP8(5S,6)及其编码蛋白cFKBP8通过下调多巴胺D3受体(DRD3)表达，抑制AMPK/mTOR/ULK1自噬信号通路，从而促进慢性不可预知温和应激(CUMS)小鼠抑郁样行为的分子机制。研究人员通过病毒介导的基因过表达、行为学测试和分子生物学技术，发现激活DRD3或过表达DRD3可逆转该效应，为重大抑郁症(MDD)的诊断和治疗提供了新靶点。

　　

研究背景
重大抑郁症(MDD)是全球第二大疾病负担，但其发病机制尚未完全阐明。环状RNA(circRNA)作为新型非编码RNA，近年来被发现可编码功能性蛋白参与疾病进程。东南大学医学院团队前期研究发现，灵长类特异性circFKBP8(5S,6)在MDD患者中异常高表达，其编码的127氨基酸蛋白cFKBP8通过干扰糖皮质激素受体入核促进小鼠应激易感性，但具体分子机制不明。

研究方法
研究采用CUMS小鼠模型，通过立体定位注射rAAV病毒在 prelimbic cortex(PrL)神经元特异性过表达circFKBP8(5S,6)或cFKBP8。结合RNA测序、Western blot、免疫荧光等技术分析DRD3及其下游AMPK/mTOR/ULK1自噬通路变化。使用DRD3激动剂卡利拉嗪(0.2 mg/kg)和DRD3过表达病毒进行干预实验，通过蔗糖偏好实验(SPT)、强迫游泳实验(FST)和悬尾实验(TST)评估抑郁样行为。

研究结果

1. 潜在靶点鉴定：RNA测序显示circFKBP8(5S,6)和cFKBP8共同调控117个差异基因，DRD3在神经活性配体-受体相互作用通路中下调最显著。

2. DRD3通路调控：过表达circFKBP8(5S,6)或cFKBP8显著降低CUMS小鼠PrL区DRD3表达，抑制AMPK(Thr172)和ULK1(Ser555)磷酸化，增强mTOR和ULK1(Ser757)磷酸化。

3. 自噬水平抑制：LC3B-II/LC3B-I比值降低、p62积累、Beclin1减少及LC3B斑点减少证实自噬流受阻，该效应在CUMS模型中加剧。

4. DRD3干预效果：卡利拉嗪治疗或DRD3过表达均能逆转抑郁样行为，激活AMPK/ULK1(Ser555)和AMPK/mTOR/ULK1(Ser757)通路，恢复自噬水平。

结论与意义
该研究首次阐明circFKBP8(5S,6)/cFKBP8-DRD3-AMPK/mTOR/ULK1轴通过调控神经元自噬影响应激易感性的分子机制（如图7所示）。不仅为circRNA编码蛋白的功能研究提供范式，更为MDD的精准诊疗提供新思路：DRD3激动剂和自噬激活剂可能成为潜在治疗策略。论文发表于《Genes》杂志，其创新性在于将circRNA编码功能、单胺类神经递质受体与自噬三大领域有机结合，为理解MDD异质性提供了整合性理论框架。

局限与展望
研究未阐明circFKBP8(5S,6)调控DRD3表达的具体方式，且小鼠模型需进一步在灵长类中验证。未来可探索：①DRD3是否为糖皮质激素受体靶基因；②开发靶向降解circFKBP8(5S,6)的基因治疗工具。