卵泡液外泌体miRNA与颗粒细胞mRNA的差异表达网络：揭示多囊卵巢综合征胰岛素抵抗的分子机制

本研究针对多囊卵巢综合征(PCOS)合并胰岛素抵抗(IR)的分子机制难题，通过高通量测序技术分析卵泡液(FF)外泌体(EVs)miRNA与颗粒细胞mRNA的差异表达谱，首次构建PCOS-IR特异性miRNA-mRNA调控网络。研究发现43个差异miRNAs和797个差异mRNAs，验证了miR-324-5p等4个关键miRNA，揭示其通过PI3K-Akt等通路调控颗粒细胞功能，为PCOS-IR的诊疗提供新靶点。

　　

多囊卵巢综合征(PCOS)作为育龄女性最常见的内分泌代谢疾病，困扰着全球5%-10%的女性。其典型表现为排卵障碍、高雄激素血症和卵巢多囊样改变，而约75%患者伴随的胰岛素抵抗(IR)更是加剧了生殖与代谢紊乱。尽管既往研究揭示了卵泡液外泌体(EVs)携带的microRNA(miRNA)可能通过调控颗粒细胞功能参与PCOS发病，但针对PCOS-IR这一高危亚群的分子机制仍如雾里看花。

山东中医药大学附属医院生殖与遗传中心的研究团队在《Reproductive BioMedicine Online》发表重要成果，首次绘制了PCOS-IR患者卵泡液(FF)来源EVs miRNA与颗粒细胞mRNA的协同调控图谱。研究团队收集了PCOS-IR、单纯PCOS和健康对照三组人群的卵泡液及颗粒细胞样本，采用miRNA测序、mRNA转录组测序和qRT-PCR验证等技术，系统解析了PCOS-IR特异的分子特征。

临床参与者
研究严格遵循伦理规范，纳入15例PCOS-IR和15例PCOS患者的体外受精(IVF)治疗样本。基线数据显示PCOS-IR组空腹胰岛素(FINS)和稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)显著升高，确立了特征性研究队列。

结果

1. 差异miRNA鉴定：发现43个FF-EVs差异表达miRNA(DEmiRs)，功能分析显示其显著富集于代谢和信号转导通路。qRT-PCR验证了miR-324-5p、miR-345-5p、miR-500a-3p和let-7i-3p的差异表达模式。
2. 差异mRNA特征：颗粒细胞中鉴定797个差异mRNA(DEmRNAs)，涉及转录调控、脂代谢、凋亡和免疫等生物学过程。
3. 调控网络构建：整合分析筛选出174个核心靶基因，主要调控PI3K-Akt信号通路、内吞作用、钙信号通路和自噬等关键通路。

讨论与结论
该研究创新性地揭示了PCOS-IR患者FF-EVs miRNA通过"远程调控"颗粒细胞基因表达的分子模式。特别值得注意的是，异常表达的miR-324-5p等分子可能通过PI3K-Akt通路加剧胰岛素抵抗微环境，而let-7i-3p的失调则与脂代谢紊乱密切相关。这些发现不仅为理解PCOS-IR的卵巢局部病理机制提供了全新视角，更为开发基于外泌体miRNA的早期诊断标志物和靶向治疗策略奠定了理论基础。研究团队强调，未来需要进一步探索这些差异分子在卵泡发育障碍中的因果关联，为改善PCOS-IR患者的生殖预后开辟新途径。