响尾蛇毒激活3T3-L1前脂肪细胞释放PGE2的机制研究：COX-2表达依赖性与EP2受体调控作用

本研究揭示了巴西响尾蛇（Crotalus durissus terrificus）毒液通过激活脂肪组织前体细胞释放前列腺素E2（PGE2）的新机制，发现该过程依赖环氧合酶-2（COX-2）表达并通过PGE2 EP2受体负反馈调控，为蛇毒系统性毒性作用提供了脂肪组织这一新靶点。

　　

研究背景
在全球范围内，蛇咬伤仍是重大公共卫生威胁，其中响尾蛇属（Crotalus）毒液以强效神经毒性、肌坏死和肾衰竭著称，但对其影响脂肪组织（Adipose Tissue, AT）的作用机制尚未阐明。脂肪组织作为内分泌器官，能分泌前列腺素E₂（PGE₂）等免疫调节分子，而PGE₂在炎症反应中具有"双刃剑"特性——既能促进血管通透性，又能刺激抗炎因子释放。此前研究发现，Crotalus durissus terrificus毒液（CdtV）可诱导巨噬细胞产生PGE₂，但其对脂肪前体细胞的作用仍是空白。

研究方法
研究团队采用3T3-L1小鼠前脂肪细胞模型，通过MTT法评估细胞活性后，使用5-10μg/mL CdtV处理细胞3-48小时。采用酶免疫分析法（EIA）定量PGE₂释放，Western blot检测COX-1、COX-2和EP2受体蛋白表达，并运用选择性抑制剂（SC-560/NS-398）和受体拮抗剂（AH6809等）进行机制解析。

研究结果

1. CdtV刺激PGE₂释放
   

   
   
   5-10μg/mL CdtV在3-48小时内显著增加PGE₂分泌，峰值出现在24小时。

2. COX双通路参与调控
   

   
   
   COX-1抑制剂SC-560和COX-2抑制剂NS-398均能抑制PGE₂产生。Western blot显示CdtV（10μg/mL）在1-48小时内持续上调COX-2表达，但不改变COX-1水平。

3. EP2受体介导负反馈
   

   
   
   EP2受体拮抗剂AH6809使PGE₂释放量增加2倍，提示PGE₂通过EP2受体抑制自身分泌。其他EP受体拮抗剂无此效应，且CdtV不改变EP2受体表达水平。

研究意义
该研究首次证实CdtV通过双重机制激活前脂肪细胞：①直接激活COX-1酶活性和诱导COX-2表达促进PGE₂合成；②分泌的PGE₂通过EP2受体建立自分泌负反馈环路。这一发现拓展了对蛇毒系统毒性作用的认识，揭示脂肪组织作为新的靶器官可能参与蛇毒中毒的全身反应，为开发针对脂质介质通路的辅助治疗策略提供理论依据。研究由Funda??o Butantan团队完成，成果发表于《Archives of Toxicology》。