靶向Ena/VASP-EVH1与WAVE2互作：抑制肿瘤转移的新策略

这篇研究揭示了Ena/VASP-EVH1与WAVE2的相互作用在肿瘤转移中的关键作用。通过阻断EVH1-WAVE2互作（利用小分子抑制剂或基因修饰），显著抑制了三阴性乳腺癌（TNBC）细胞MDA-MB-231的趋化性、细胞外渗及体内转移。研究阐明了该互作通过调控肌动蛋白（F-actin）聚合速率和片状伪足（lamellipodia）突起来驱动转移的分子机制，为开发抗转移药物提供了新靶点。

　　

Significance
蛋白质-蛋白质相互作用在肿瘤转移中扮演核心角色。研究发现，Ena/VASP家族蛋白与WAVE2的相互作用通过独特的二级结构调控片状伪足突起和细胞运动。靶向这一互作的Ena/VASP-EVH1抑制剂展现出抑制转移的潜力，为改善患者预后提供了新思路。

Abstract
癌症治疗亟需抑制转移过程中的细胞运动。研究聚焦于Ena/VASP蛋白与WAVE调控复合体（WRC）的交叉对话，发现WAVE2中的EVH1识别基序突变可阻断三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的趋化性和斑马鱼模型中的外渗。小鼠原位移植实验显示，该突变显著减少大转移并延长生存期。药理学干预同样证实了Ena/VASP-EVH1抑制剂的抗转移效果。

Results

A PRM of WAVE2 Binds Directly to Ena/VASP-EVH1
质谱分析发现WAVE2（而非WAVE1/3）通过其富含脯氨酸的基序（PRM）直接结合VASP-EVH1，解离常数（K_d）为250 μM。Pull-down实验显示，Ena/VASP-EVH1抑制剂可竞争性阻断WAVE2、ABI1和RAPH1的结合。将WAVE2的LPPPP基序突变为LGSPP后，其与EVH1的相互作用几乎完全丧失。

Disruption of the Ena/VASP–WAVE2 Interaction Impairs Chemotaxis
MDA-MB-231细胞中WAVE2^GSPP突变导致：

1. Boyden小室侵袭实验显示侵袭能力下降至无血清对照组水平；
2. 活细胞追踪显示随机迁移（无趋化性），但速度不变；
3. 免疫荧光显示片状伪足中F-actin和VASP募集减少；
4. TIRF显微镜观察到膜突起速度降低50%。

体外肌动蛋白聚合实验进一步揭示，野生型PRM^wt-VCA与VASP协同可将聚合速率提升3倍，而突变体无此效应。

In Vivo Metastasis Suppression
斑马鱼模型中，WAVE2^GSPP细胞的外渗减少70%。小鼠原位移植实验显示：

• 原发性肿瘤体积无差异；
• WAVE2^GSPP组转移灶面积减少85%；
• 中位生存期延长2倍。

Pharmacological Intervention
Ena/VASP-EVH1抑制剂（400 nM亲和力）的药代动力学显示：

• 皮下注射（100 mg/kg）可实现8 μM峰浓度；
• 渗透泵给药维持1 μM稳态浓度。
  在胰腺癌PANC-1模型中，抑制剂治疗组57%小鼠无转移灶，肝肺重量显著减轻。

Discussion
Ena/VASP-WAVE2互作通过双重机制驱动转移：

1. 增强WRC与Ena/VASP的复合体稳定性；
2. 加速VASP依赖的肌动蛋白聚合，促进膜突起。
   该研究首次阐明WAVE2特异性基序的生物学意义，并为开发广谱抗转移药物奠定基础。未来需优化抑制剂药代特性，并在更多转基因模型中验证疗效。

Materials and Methods
关键技术包括：

• CRISPR/Cas9构建WAVE2^KO细胞系；
• ¹⁶O/¹⁸O标记定量质谱分析互作组；
• 斑马鱼尾鳍外渗模型（fli:EGFP转基因系）；
• 小鼠原位移植联合活体成像。所有实验均通过伦理审查，统计显著性设定为P<0.05。