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HEK293T细胞中过表达形成的NOS1AP聚集体无淀粉样蛋白特性研究
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年06月27日 来源:Cell and Tissue Biology
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来自实验室的研究人员针对NOS1AP(神经元一氧化氮合酶1适配蛋白)聚集体与精神疾病(如精神分裂症)的潜在关联展开研究。通过优化免疫共沉淀技术分离HEK293T细胞中的NOS1AP聚集体,结合刚果红染色及偏振光检测,首次证实其不具备淀粉样蛋白特征(无苹果绿双折射/无纤维形态)。该发现为阐明NOS1AP在细胞内的病理机制提供了新视角。
作为神经元一氧化氮合酶1(nNOS)的关键适配蛋白,NOS1AP(Nitric Oxide Synthase 1 Adaptor Protein)在细胞增殖、凋亡调控及树突发育中扮演重要角色。既往研究暗示其聚集体可能与精神疾病相关,但关于其是否具有淀粉样蛋白特性仍存疑。
研究团队通过优化实验方案,首次系统评估了人源HEK293T细胞中过表达形成的NOS1AP聚集体的理化特性。采用多克隆抗体免疫共沉淀技术分离聚集体后,刚果红染色实验显示:在偏振光下未观察到淀粉样蛋白典型的苹果绿双折射现象,电镜分析进一步揭示其呈现无定形态而非β-折叠纤维结构。
这一发现挑战了关于NOS1AP聚集体致病机制的传统假设,提示其可能通过非淀粉样蛋白途径参与神经病理过程。研究建立的免疫共沉淀优化方案为后续探索蛋白质异常聚集与神经精神疾病的关联提供了方法学参考。
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