重组犬瘟热病毒表达水貂肠炎病毒VP2蛋白病毒样颗粒的双价疫苗可同时抵御两种致死性病毒感染

为解决水貂养殖业中犬瘟热病毒(CDV)和水貂肠炎病毒(MEV)双重威胁，中国研究人员通过反向遗传学构建了表达MEV VP2蛋白的重组CDV3疫苗株rCDV3-mVP2。该疫苗在Vero细胞中形成具有血凝活性的病毒样颗粒(VLPs)，接种水貂后诱导中和抗体(CDV:43；MEV:128)，实现100%保护率，显著降低病毒脱落和组织病理损伤，为水貂传染病防控提供了创新性双价活疫苗解决方案。

　　

水貂养殖业长期面临两大毁灭性传染病的威胁：由犬瘟热病毒(Canine distemper virus, CDV)引起的犬瘟热(CD)和水貂肠炎病毒(Mink enteritis virus, MEV)导致的水貂病毒性肠炎(MVE)。这两种疾病分别造成严重的呼吸道综合征和急性肠炎，死亡率极高，给全球毛皮动物产业带来巨大经济损失。传统防控手段依赖单苗接种或联苗组合，存在免疫程序复杂、交叉保护不足等问题。

针对这一行业痛点，黑龙江八一农垦大学的研究团队创新性地利用已在中国水貂中使用的CDV3减毒疫苗株为载体，通过反向遗传学技术构建了表达MEV VP2衣壳蛋白的重组病毒rCDV3-mVP2。这项发表于《Veterinary Microbiology》的研究首次证实，重组CDV可同时作为CD和MVE的双价活疫苗，为经济动物传染病防控提供了新范式。

关键技术方法包括：1）使用表达犬SLAM受体的Vero细胞(VerodogSLAM)进行病毒拯救；2）通过BSR/T7系统实现cDNA克隆重组；3）采用血凝试验验证VP2蛋白功能；4）以10^4.0 TCID₅₀剂量免疫断奶水貂(n=20)；5）分别用高毒力CDV毒株SD(14)7和MEV野毒LN-10进行攻毒保护试验。

【Generation of recombinant CDV3 expressing MEV VP2】
研究团队成功将MEV VP2基因插入CDV3基因组P/M基因间隔区，构建的重组病毒rCDV3-mVP2在连续传代30代后仍保持遗传稳定性。电镜观察显示，VP2在Vero细胞中自组装成直径约25nm的病毒样颗粒，并保留天然血凝活性，效价达2⁸。

【Protective efficacy evaluation】
免疫后3周，rCDV3-mVP2组水貂产生高水平CDV中和抗体(几何均值43)和MEV血凝抑制抗体(128)，而亲本株CDV3仅诱导CDV特异性免疫应答。攻毒实验显示：1）CDV攻击组全部存活，未出现典型神经症状；2）MEV攻击组无肠炎临床表现，粪便病毒载量降低100倍；3）病理分析显示疫苗接种显著减轻肺部和肠道组织病变。

【Discussion】
该研究突破性地实现了单一载体病毒同时预防两种重要动物传染病：1）VP2形成的VLPs模拟天然抗原结构，克服了传统亚单位疫苗免疫原性弱的局限；2）CDV载体保留了活疫苗的强免疫诱导能力，又通过基因重组确保安全性；3）相较于现行联苗方案，简化了免疫程序并降低生产成本。

研究结论表明，rCDV3-mVP2作为首个CDV-MEV双价活疫苗，不仅能完全保护水貂抵御致死剂量攻击，还可通过减少病毒排放阻断传播链。这一策略为开发其他经济动物多联疫苗提供了重要参考，特别是为建立"一针防多病"的动物疫苗体系开辟了新途径。作者建议后续研究应关注该疫苗在不同品种水貂中的免疫持续期，以及与其他常见水貂病原体疫苗的联合使用方案。