性别与膳食ALA及DHA对大鼠心脏磷脂酶A2介导脂肪酸释放与氧脂素生成的影响及其心血管意义

本研究通过分析膳食α-亚麻酸（ALA）和二十二碳六烯酸（DHA）对雌雄大鼠心脏磷脂酶A2（PLA2）活性的调控作用，揭示sPLA2和iPLA2选择性介导多不饱和脂肪酸（PUFA）释放及氧脂素生成的差异，阐明饮食与性别因素在心血管氧脂素生物学中的关键作用，为靶向PLA2的心血管疾病干预策略提供新依据。

　　

心血管疾病的发生发展与脂质代谢紊乱密切相关，其中磷脂酶A₂（PLA₂）介导的多不饱和脂肪酸（PUFA）释放及后续氧脂素（oxylipins）生成是核心调控环节。然而，饮食中不同PUFA（如植物来源的α-亚麻酸ALA与海洋来源的二十二碳六烯酸DHA）如何通过PLA₂亚型影响这一过程，以及性别因素在其中扮演的角色，仍是未解之谜。更棘手的是，现有PLA₂抑制剂在临床试验中屡屡失败，部分归因于对氧脂素生成机制的认识不足。

为破解这一难题，加拿大曼尼托巴大学的研究团队在《Prostaglandins, Leukotrienes and Essential Fatty Acids》发表了一项开创性研究。他们采用膳食干预结合特异性抑制剂策略，首次系统揭示了sPLA₂和iPLA₂在大鼠心脏中调控PUFA释放与氧脂素生成的差异化机制，并发现性别与膳食脂肪酸存在显著交互作用。这项研究不仅为理解心血管氧脂素生物学提供了新视角，更为精准营养干预和靶向药物开发奠定了理论基础。

关键技术方法
研究选用24只4周龄Sprague-Dawley大鼠（雌雄各半），随机接受含1.3% ALA或DHA的改良AIN93G饲料喂养6周。通过心脏匀浆体外孵育实验，分别使用甲基花生四烯酸氟磷酸酯（MAFP）抑制iPLA₂/cPLA₂、Varespladib（VAR）抑制sPLA₂，采用高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）定量非酯化PUFA和氧脂素，数据通过三因素重复测量方差分析处理。

主要研究结果

1. 抑制剂对PLA₂活性的影响
MAFP与VAR的抑制效果呈现互补性：MAFP处理后剩余活性反映sPLA₂作用，VAR处理后反映iPLA₂/cPLA₂活性。值得注意的是，cPLA₂贡献可忽略不计，这与既往大鼠心脏研究一致。

2. PLA₂亚型的选择性特征
sPLA₂展现显著DHA偏好性，贡献50% DHA释放及相应氧脂素生成，但对花生四烯酸（ARA）氧脂素的贡献仅30%。相反，iPLA₂呈现广谱活性，能释放所有检测的PUFA（ALA、EPA、ARA、DHA），其主导释放的PUFA类型取决于膳食来源——DHA膳食促进DHA释放，ALA膳食促进ALA/ARA释放。

3. 膳食与性别的交互影响
膳食成分显著调节PLA₂活性方向：DHA膳食增强sPLA₂和iPLA₂对DHA及其氧脂素的作用，ALA膳食则增强对ALA/ARA通路的影响。性别差异呈现复杂模式：雌性心脏中DHA、EPA和ALA释放更高，而雄性则产生更多二高-γ-亚麻酸（DGLA）和环氧化酶（COX）衍生的ARA氧脂素。引人注目的是，膳食DHA可削弱雄性在COX-ARA氧脂素生成上的优势。

结论与意义
该研究首次阐明：1）sPLA₂和iPLA₂通过差异化机制调控心脏PUFA代谢网络，前者具有明确的DHA倾向性，后者则充当膳食脂肪酸的"传感器"；2）性别效应存在PUFA特异性，且能被膳食DHA部分调控；3）氧脂素生成不能简单通过PUFA释放量预测，强调同时检测两者的必要性。这些发现不仅解释了既往PLA₂抑制剂临床试验的局限性——忽略亚型选择性和膳食背景的影响，更提示未来心血管疾病精准干预需综合考虑PLA₂亚型分布、患者性别及膳食结构。研究建立的体外分析方法为后续靶向PLA₂亚型的药物筛选提供了重要技术平台。