Pseudomonas plecoglossicida中PAAR-1基因的鉴定与功能解析：揭示T6SS-1调控大黄鱼免疫应答与凋亡的分子机制

本研究首次在Pseudomonas plecoglossicida中鉴定出T6SS-1核心效应基因PAAR-1，通过构建突变株ΔPAAR-1，揭示其通过调控TLR信号通路（如TLR1/2/5上调和TLR3/7/8/9下调）及凋亡相关基因（AP-1、Caspase8等）影响细菌毒力与宿主免疫应答，为水产病原体防控提供了新靶点。

　　

在海水养殖业中，由Pseudomonas plecoglossicida引发的内脏白点病(VWND)导致大黄鱼(Larimichthys crocea)大规模死亡，每年造成数亿元经济损失。这种病原体的毒力与其VI型分泌系统(T6SS)密切相关，但作为T6SS核心组分的PAAR蛋白在该菌中的功能尚未阐明。福建农林大学的研究团队通过多学科交叉研究，首次揭示了PAAR-1基因通过双重调控宿主免疫与凋亡途径促进感染的分子机制，相关成果发表于《Aquaculture》。

研究采用基因组挖掘、基因敲除（ΔPAAR-1构建）、体外细胞感染模型（LYC-FM巨噬细胞系）、转录组测序及RT-qPCR验证等关键技术，结合大黄鱼活体感染实验（样本来自福建宁德养殖场），系统解析了PAAR-1的生物学功能。

主要结果

1. PAAR-1的鉴定与分泌机制
   在P. plecoglossicida PQLYC4菌株的T6SS-1基因簇中发现未注释基因HAV28_16300，其编码的135aa蛋白含PAAR_4结构域和特征性PAAR基序，系统发育分析证实其为新型PAAR家族成员。分泌实验显示PAAR-1依赖T6SS-1分泌，且ΔPAAR-1导致Hcp-1分泌量下降50%。

2. PAAR-1的致病表型调控
   ΔPAAR-1突变株呈现四重缺陷：生物膜形成能力降低37%、粘附效率下降42%、总抗氧化能力(T-AOC)减少28%、巨噬细胞内存活率降低55%。活体感染实验中，突变株使大黄鱼死亡率从80%降至20%，脾脏结节数减少75%。

3. 免疫通路调控网络
   转录组分析揭示PAAR-1通过"双开关"机制调控TLR通路：上调质膜TLR（TLR1/2/5）表达2-3倍，同时下调内体TLR（TLR3/7/8/9）及其下游分子MyD88、TRAF3表达40-60%。RT-qPCR证实凋亡相关基因AP-1、NF-κB、FAS-L表达量下降50%-70%，LYC-PKM细胞凋亡率降低65%。

结论与意义
该研究首次阐明PAAR-1作为T6SS-1的"分子矛尖"，通过重塑TLR信号通路空间分布（质膜vs内体）和抑制凋亡级联反应，协同促进细菌免疫逃逸。这不仅为理解T6SS效应蛋白的跨物种进化提供了新视角，更通过揭示PAAR-1-TLR-凋亡轴，为开发针对P. plecoglossicida的亚单位疫苗（如PAAR-1缺失株）奠定了理论基础。研究团队特别指出，PAAR-1的温度依赖性分泌特性（12-28℃）与其季节性流行病特征高度吻合，这为水产病害的精准防控提供了重要依据。