合成mRNA转染牛细胞诱导表达抗胎儿三毛滴虫表面抗原TF1.17功能性抗体的研究

为解决牛生殖道三毛滴虫病缺乏有效疗法的难题，研究人员通过合成mRNA转染技术，诱导牛细胞表达靶向寄生虫表面抗原TF1.17的IgG1抗体。实验证实抗体可显著降低寄生虫活力及细胞病变效应（p<0.05），为开发新型mRNA疗法奠定基础。

　　

牛生殖道三毛滴虫病是由胎儿三毛滴虫（Tritrichomonas foetus, T. foetus）引起的性传播寄生虫病，感染公牛成为无症状携带者，导致牛群大规模传播。目前美国尚无获批疗法，仅能通过淘汰感染公牛控制疫情。传统疫苗免疫效果不稳定，而黏膜mRNA疗法在HIV抗体表达中已展现潜力，这为开发新型干预策略提供了思路。

美国埃默里大学等机构的研究团队在《Experimental Parasitology》发表研究，首次利用合成mRNA转染牛肾细胞（BK）和阴茎角质细胞（PK），诱导表达靶向T. foetus表面抗原TF1.17两个表位（TF1.15和TF1.17）的牛IgG1抗体。通过融合纳米荧光素酶（NanoLuc）报告系统，证实转染后24-48小时抗体表达量较对照组提升5000-25000倍（p<0.05）。抗体能特异性结合活体寄生虫，显著降低其活力，并减少宿主细胞病变效应（p<0.05）。

关键技术包括：1）基于杂交瘤细胞mRNA模板设计合成抗体编码序列；2）构建膜锚定型和分泌型两种载体；3）采用NanoLuc报告系统定量抗体表达；4）建立T. foetus与转染细胞共培养模型评估细胞保护效果。

【Synthetic mRNA design and construction】
研究人员从杂交瘤细胞中获取靶向TF1.15/TF1.17表位的鼠IgM mRNA模板，经序列优化后合成牛IgG1重链和轻链mRNA，其中轻链融合NanoLuc标签。构建的四种mRNA载体包含分泌信号肽或跨膜结构域。

【Expression of anti-TF1.17 antibodies】
转染后检测显示：膜锚定型抗体主要存在于细胞裂解液（表达量提升100-800倍），分泌型抗体富集于上清（5000-25000倍）。两种形式抗体均能结合活体寄生虫（p=0.001），且浓缩抗体处理可显著降低寄生虫活力。

【Discussion】
该研究首次证明mRNA转染可诱导牛细胞表达功能性抗寄生虫抗体。与疫苗接种相比，mRNA疗法能快速产生高浓度抗体，且通过局部给药可能突破黏膜免疫屏障。虽然体内效果需进一步验证，但为开发"一次性注射治愈"的创新疗法提供了理论依据。

研究得到美国农业部国家食品与农业研究所资助，技术路线涉及合成生物学、免疫工程和寄生虫学多学科交叉。作者特别致谢提供杂交瘤细胞株的Lynette Corbeil教授和提供T. foetus C491菌株的Richard Hopper教授。