靶向HIV-1感染细胞的FITC.CAR-T细胞疗法：基于FITC标记抗体的增强型细胞毒性研究

为解决HIV-1潜伏库清除难题，吉林大学第一医院团队开发了一种新型FITC.CAR-T策略，通过结合FITC标记的广谱中和抗体（bNAbs），实现对HIV-1感染细胞的精准靶向清除。研究显示，该疗法对B、C、O亚型HIV-1感染CD4+ T细胞的细胞毒性达70%，在ART中断后的人源化BLT小鼠模型中病毒载量降低90%，为功能性治愈HIV提供了模块化治疗平台。

　　

人类免疫缺陷病毒（HIV）感染至今仍是全球健康重大威胁，尽管抗逆转录病毒疗法（ART）能有效控制病毒复制，但潜伏感染的细胞库和免疫逃逸机制导致病毒无法根除。这些“躲藏”的病毒一旦治疗中断就会卷土重来，使得3900万感染者终身依赖药物。更棘手的是，长期用药可能引发耐药突变和免疫功能障碍。传统CAR-T疗法虽在癌症领域大放异彩，但应用于HIV治疗时面临两大瓶颈：基于CD4的嵌合抗原受体（CAR）可能成为病毒入侵的新通道，而直接靶向HIV包膜蛋白（Env）的广谱中和抗体（bNAbs）又缺乏应对病毒变异的灵活性。

吉林大学第一医院传染病团队另辟蹊径，将抗体工程的“导航”功能与CAR-T细胞的“杀伤”能力巧妙结合。他们设计了一种革命性的FITC.CAR分子——其核心是能识别荧光素（FITC）的单链抗体片段（scFv），就像给T细胞装上了“万能钥匙孔”。当与三种FITC标记的HIV抗体（VRC01、10E8、N6）配对时，这些抗体既充当“GPS”精确定位病毒蛋白，又作为“开关”激活CAR-T细胞。这种设计突破性地实现了“一细胞多抗体”的模块化治疗，理论上只需更换不同抗体就能应对变异毒株甚至其他病原体。

研究采用多学科技术联合作战：从ART治疗的HIV感染者中获取原代CD4⁺ T细胞建立潜伏感染模型；通过慢病毒载体将含CD3ζ/CD28/4-1BB信号域的FITC.CAR导入T细胞；利用流式细胞术评估CAR表达效率；采用荧光标记抗体追踪靶向结合能力。在机制验证阶段，团队创新性地将实验室病毒株感染模型、患者来源细胞模型与人源化BLT小鼠模型形成证据链闭环。

【Patient and donor samples】
研究团队通过伦理审查获取了吉林大学第一医院感染科收治的HIV感染者外周血样本，并设立健康 donor 对照组，为后续实验提供临床相关性数据支撑。

【The genetic construction and expression of FITC.CAR against HIV-1】
基因工程构建的FITC.CAR包含抗FITC scFv、CD8跨膜域及三重共刺激分子（图1A），转染293T细胞后显示>80%表达效率。当与FITC-10E8抗体结合时，对HIV-1感染细胞的杀伤效果较传统CD4.CAR提升2.3倍，且未观察到“假激活”现象。

【Discussion】
相较于第三代CAR-T，该平台展现出三大突破：1）通过抗体置换应对Env变异，对B/C/O亚型均保持>65%杀伤率；2）在潜伏再激活模型中清除92%病毒DNA；3）BLT小鼠停止ART后，病毒反弹时间延迟21天。尤其值得注意的是，FITC-N6组合对具有“免疫逃逸突变”的临床分离株仍保持68%有效性。

【Conclusion】
这项发表于《International Journal of Biological Macromolecules》的研究开创性地将FITC.CAR技术应用于HIV治疗领域。其核心价值在于：1）首次证明抗体-CAR动态组合可克服病毒变异；2）在功能性治愈指标上取得突破——患者来源细胞中病毒储存库减少1.7个log值；3）为其他传染病（如HBV、EBV）提供技术范式。正如通讯作者W.Y.Z.强调的，这种“即插即用”平台或将重新定义细胞免疫治疗的发展方向。