绦虫囊尾蚴外泌体tpi-miR-10a-5p靶向MAP3K7抑制宿主炎症通路揭示免疫逃逸新机制

语 本研究针对兔肝片形绦虫（T. pisiformis）囊尾蚴通过外泌体介导免疫逃逸的关键难题，首次揭示其分泌的tpi-miR-10a-5p通过靶向MAP3K7-JNK信号轴调控宿主外周血淋巴细胞（PBLCs）炎症因子表达的分子机制。研究发现感染兔体内tpi-miR-10a-5p显著上调，特异性抑制MAP3K7导致JNK磷酸化受阻，进而降低IFN-γ和TNFα等炎性因子产生。该成果为寄生虫免疫逃避策略提供新视角，为抗蠕虫药物靶点研发奠定理论基础。

　　

论文解读

在兔养殖业中，由兔肝片形绦虫（Taenia pisiformis）幼虫引起的囊尾蚴病可导致消瘦、繁殖力下降甚至死亡，造成严重经济损失。这种寄生虫的六钩蚴侵入宿主后，会迁移至肝脏和腹腔定植。尽管已知外周血淋巴细胞（PBLCs）在抗寄生虫免疫中发挥核心作用，但绦虫如何调控宿主免疫反应以实现长期寄生仍不明朗。近年研究发现，寄生虫分泌的外泌体可作为"分子快递"，携带微小RNA（miRNA）等物质干扰宿主细胞功能，成为免疫调节的关键媒介。

中国农业科学院兰州兽医研究所团队在《Veterinary Parasitology》发表的研究，首次阐明T. pisiformis囊尾蚴外泌体源tpi-miR-10a-5p通过靶向MAP3K7-JNK信号通路调控宿主炎症反应的完整机制。研究采用纳米颗粒追踪（NTA）和透射电镜（TEM）技术证实囊尾蚴分泌直径30-140 nm的典型外泌体（图1A,B），并通过RT-PCR及测序验证外泌体中高表达tpi-miR-10a-5p（图1C）。感染兔血液及PBLCs中该miRNA显著上调，预示其参与宿主免疫调控。

关键技术与方法
研究通过双荧光素酶报告基因实验验证tpi-miR-10a-5p与MAP3K7（mitogen-activated protein kinase kinase kinase 7）的靶向关系；利用siRNA敲低和过表达技术处理PBLCs，结合蛋白质印迹（Western blot）分析JNK信号通路关键蛋白（JNK/p-JNK）及炎症因子（IFN-γ、TNFα）变化；采用囊尾蚴外泌体处理PBLCs模拟体内感染环境；建立兔感染模型进行体内验证。

研究结果

1. 外泌体介导miRNA传递
   T. pisiformis囊尾蚴外泌体可将其标志性分子tpi-miR-10a-5p释放至兔血液循环系统，感染兔PBLCs中该miRNA表达量显著升高，提示外泌体是寄生虫-宿主跨细胞通讯的重要载体。

2. 靶向调控MAP3K7-JNK轴
   双荧光素酶报告系统证实tpi-miR-10a-5p直接结合MAP3K7的3'UTR区。在PBLCs中敲低MAP3K7可抑制c-Jun N末端激酶（JNK）磷酸化，降低IFN-γ和TNFα表达；过表达MAP3K7则激活JNK通路并促进炎症因子产生。当用囊尾蚴外泌体处理PBLCs时，重现了MAP3K7敲低表型，证实寄生虫外泌体通过递送miRNA模拟靶基因抑制效应。

3. 体内感染验证免疫抑制
   感染兔PBLCs中MAP3K7、JNK、p-JNK及炎症因子表达同步下降，与体外实验结果一致。表明tpi-miR-10a-5p通过抑制MAP3K7-JNK信号转导，削弱宿主促炎反应，为寄生虫创造免疫耐受环境。

结论与意义
该研究揭示T. pisiformis采用"外泌体-miRNA-信号通路"三级调控模式：囊尾蚴分泌外泌体递送tpi-miR-10a-5p至宿主PBLCs → 特异性抑制MAP3K7表达 → 阻断JNK通路活化 → 减少IFN-γ/TNFα等炎症因子产生 → 实现免疫逃逸。这一机制解析了寄生虫在长期进化中形成的精密免疫调节策略，不仅为理解蠕虫感染免疫病理提供新范式，更提示MAP3K7-JNK通路可作为抗囊尾蚴病药物研发的新靶标。研究团队通过整合外泌体组学、分子靶向验证和感染模型，建立了寄生虫-宿主互作研究的方法学框架，为其他蠕虫病免疫逃避机制研究提供借鉴。