PARP抑制剂talazoparib与溶瘤病毒RT3D协同激活RIG-I/NF-κB通路实现肿瘤免疫治疗新突破

本研究针对溶瘤病毒单一疗法临床响应率低的难题，通过高通量筛选发现PARP抑制剂talazoparib可显著增强双链RNA病毒RT3D的抗肿瘤效果。研究揭示PARP-1通过PAR化修饰凋亡通路关键蛋白抑制病毒诱导的细胞死亡，而talazoparib通过阻断PARP-1与RIG-I的相互作用，激活TRAIL/TNF介导的外源性凋亡和NF-κB炎症信号，在免疫健全小鼠模型中实现100%肿瘤清除并建立免疫记忆。该研究为拓展PARP抑制剂在非HR缺陷肿瘤中的应用提供了新策略。

　　

在肿瘤治疗领域，溶瘤病毒疗法虽展现出独特潜力，但除T-VEC获批用于黑色素瘤外，多数临床尝试因单药疗效有限而折戟。与此同时，PARP抑制剂的应用被严格限制于同源重组修复缺陷的肿瘤类型，其与溶瘤病毒的协同机制更是一片空白。这一现状促使来自英国癌症研究院（The Institute of Cancer Research）的Joan Kyula-Currie团队展开探索，其突破性成果发表于《Nature Communications》。

研究团队首先采用384孔板高通量筛选平台，在BRAF^V600E突变黑色素瘤细胞系A375中测试80种抗癌药物与RT3D的协同效应。PARP抑制剂talazoparib以z值<-2的显著优势脱颖而出，这一发现在多种遗传背景的黑色素瘤和三阴性乳腺癌细胞系中得到验证。值得注意的是，在免疫缺陷小鼠模型中，0.1 mg/kg talazoparib联合10⁶ pfu RT3D使肿瘤生长抑制率达100%，而单药组仅呈现有限效果。

关键技术方法包括：基于CellTiter-Glo的384孔板高通量筛选、CRISPR-CAS9基因编辑构建RELA-GFP/PCNA-Scarlet报告系统、PARP-Trap Agarose互作检测、纳米串（Nanostring）免疫细胞浸润分析等。研究特别纳入4T1小鼠三阴性乳腺癌模型和4434小鼠黑色素瘤模型进行体内验证。

RT3D/talazoparib协同效应不依赖DNA损伤增强
通过γH2AX/53BP1焦点形成实验和碱性彗星实验证实，联合治疗未增加DNA单链断裂。细胞周期分析显示联合组亚G1期细胞比例显著增加，提示凋亡途径激活。

PARP-1缺失完全模拟联合治疗效果
在PARP-1^-/- HeLa细胞中，RT3D单药即能达到野生型细胞联合治疗的杀伤效果。siRNA沉默实验证实PARP-1（而非PARP-2/3）是调控RT3D敏感性的关键因子。

死亡诱导信号复合体（DISC）介导协同凋亡
免疫共沉淀揭示RT3D诱导PARP-1对caspase-8、FADD和RIPK1的PAR化修饰，而talazoparib处理使这些相互作用减弱62%。中和抗体实验证实TRAIL/TNFα是激活DISC的关键配体。

RIG-I/PARP-1互作调控免疫应答

。PARP-Trap实验首次证实病毒dsRNA促进PARP-1与RIG-I结合，而talazoparib以剂量依赖性方式增强这种互作，这与该药物优异的PARP"捕获"能力相符。

非病毒dsRNA可模拟病毒效应
poly I:C和3p-hRNA两种RIG-I激动剂均能复现RT3D与talazoparib的协同效应，为临床转化提供更安全的替代方案。

在免疫健全C57BL/6小鼠模型中，联合治疗组6/6实现长期无瘤生存，且治愈小鼠能抵抗二次肿瘤攻击。流式分析显示肿瘤微环境CD8⁺ T细胞浸润增加3.2倍，PD-L1⁺细胞比例提升，为后续联合免疫检查点抑制剂奠定基础。

这项研究开创性地揭示了PARP-1在病毒dsRNA感知中的新功能，突破性地将PARP抑制剂适应症扩展到非HR缺陷肿瘤。其临床意义在于：①为talazoparib与已进入III期临床的pelareorep（RT3D）联用提供理论依据；②证明合成dsRNA可替代病毒实现同等疗效，大幅降低监管风险；③通过诱导免疫记忆效应，为预防肿瘤复发提供新思路。该发现可能重塑PARP抑制剂在肿瘤免疫治疗领域的应用格局。