黄芩苷通过调控菌群-胆汁酸-肠屏障缓解二甲双胍诱导的小鼠早期腹泻的机制研究

　　

摘要: 二甲双胍降糖效果显著,但胃肠道不良反应的发生限制了其临床应用,从调节肠道菌群角度切入进行中西药联合用药为二甲双胍不耐受提供解决思路。动物实验已获得首都医科大学附属北京友谊医院动物伦理委员会批准(批准号:23-2043)。选用C57BL/6J小鼠,在高脂饮食(high-fat diet,HFD)喂养4周后,连续7天灌胃大剂量二甲双胍(metformin,250 mg·kg^-1,bid)构建腹泻小鼠模型(HFDM),另设置正常对照组(normal chow diet,NCD)、高脂饮食组(HFD)、联合用药组(构建腹泻小鼠模型时同步灌胃黄芩苷,baicalin,100 mg·kg^-1,bid,HFDMB),通过观察小鼠粪便形态、监测腹泻评分、检测粪便含水量,发现黄芩苷可缓解大剂量二甲双胍诱导的小鼠早期腹泻。对小鼠粪便进行全长16S rRNA测序,发现联用黄芩苷显著降低与腹泻正相关的索氏志贺氏菌Shigella sonnei、鸡肠球菌Enterococcus gallinarum、海氏肠球菌Enterococcus hirae的相对丰度、升高有益菌约氏乳杆菌Lactobacillus johnsonii、鼠乳杆菌Ligilactobacillus murinus、罗伊氏黏液乳杆菌Limosilactobacillus reuteri的相对丰度。对小鼠结肠内容物进行胆汁酸靶向定量分析,发现二甲双胍升高HFD小鼠结肠内容物初级胆汁酸牛磺鹅去氧胆酸(taurochenodeoxycholic acid,TCDCA)、牛磺胆酸(taurocholic acid,TCA)等,与HFDM相比,联用黄芩苷可降低初级胆汁酸。对小鼠结肠组织切片进行H&E染色、免疫组化标记紧密连接蛋白闭合带蛋白-1(zonula occludens-1,ZO-1)和闭合蛋白(occludin),发现黄芩苷联合二甲双胍可减轻大剂量二甲双胍引起的小鼠结肠损伤、增强结肠紧密连接蛋白的表达。综上,本研究揭示黄芩苷可通过调控肠道菌群-胆汁酸-肠屏障缓解大剂量二甲双胍诱导的小鼠早期腹泻,为解决二甲双胍不耐受的临床问题提供了具有科学内涵的中西药联合用药解决方案。