γ射线照射后HEK293T细胞中DNA-蛋白质交联(DPCs)的即时动态与修复机制研究

为解决电离辐射诱导DNA损伤中DNA-蛋白质交联(DPCs)的动态修复机制问题，研究人员通过碱性彗星实验(comet assay)分析HEK293T细胞在2-12?Gy γ射线照射后1-30分钟内的DPCs形成规律。发现2?Gy照射后即刻出现低迁移率核体，蛋白酶K处理可消除该现象，证实DPCs是主因。研究首次揭示DPCs在照射后持续形成10分钟但30分钟内快速修复，为肿瘤放疗抵抗机制研究提供新视角。

　　

当γ射线的能量穿透HEK293T细胞时，一种特殊的DNA损伤形式——DNA-蛋白质交联(DNA-protein crosslinks, DPCs)正在上演分子级的"纠缠大戏"。研究人员采用2-12?Gy梯度剂量照射细胞后，通过碱性彗星实验捕捉到有趣现象：仅需2?Gy照射，彗星尾中DNA含量低的"迟缓核体"便快速涌现。

温度实验揭示关键线索：4°C低温环境下，这些核体数量显著多于37°C组，暗示DPCs形成与温度敏感的生物过程相关。当蛋白酶K(proteinase K)登场"剪断"蛋白质枷锁后，核体迁移率立即恢复，直接证实蛋白质与DNA的异常交联是幕后黑手。

时间维度上更发现惊人规律：DPCs并非瞬间形成，而是在照射后持续"编织"交联网长达10分钟。但细胞修复系统展现出惊人效率——所有异常交联在30分钟内被清除殆尽，其修复速度堪比单链断裂(single strand breaks)的修复速率。这些发现为理解肿瘤放疗中DNA损伤应答提供了新的分子钟摆，也为开发针对DPCs的放射增敏剂指明方向。