基于细菌发酵的甘蔗渣高值化利用:酚类化合物生物转化效率与酶结构功能关联性研究

【字体: 时间:2025年07月15日 来源:Biomass and Bioenergy 5.8

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  本研究针对农业废弃物资源化利用难题,通过比较Pseudomonas fragi、Lactobacillus plantarum和Lactobacillus acidophilus三种菌株发酵甘蔗渣产酚类化合物的效率,发现L. acidophilus产阿魏酸(FA)达275 mg/kg,其FAE酶"盖子结构域"完整性使产量提升18%。该成果为农业废弃物高值化利用提供了菌种优选依据和酶结构优化靶点。

  

在全球每年产生数亿吨甘蔗渣的背景下,如何将这种富含木质纤维素的农业废弃物转化为高附加值产品成为可持续发展的重要课题。甘蔗渣中含有大量通过酯键结合的多酚类物质,如阿魏酸(FA)、香草醛和香草酸(VA),这些物质不仅是食品医药行业的重要原料,更具有神经保护、抗氧化等多种生理活性。然而,传统化学提取法存在环境污染问题,而微生物转化效率又受限于菌株特性和酶系统效率。

King Khalid University的研究团队在《Biomass and Bioenergy》发表研究,系统比较了Pseudomonas fragi (Psf)、Lactobacillus plantarum (Lp)和Lactobacillus acidophilus (La)三种菌株发酵甘蔗渣产酚类化合物的效率差异,并通过结构生物学揭示了影响转化效率的关键酶学机制。研究采用高效薄层色谱(HPTLC)定量分析产物,结合同源建模构建了PsfFAE三维结构模型,与PDB数据库中LaFAE、BpFAE、LpFAE进行比对分析。

【材料与方法】

研究选用脱淀粉甘蔗渣为底物,在30°C下进行12天发酵监测。通过OD600监测菌体生长,HPTLC定量FA、香草醛和VA产量。对FAE酶采用SWISS-MODEL进行同源建模,使用PyMOL进行结构比对,重点分析"盖子结构域"(lid domain)构象差异。

【结果】

  1. 菌株发酵效率比较:La在9天时FA产量最高(275 mg/kg SCB),其香草醛(15 mg/mL)和VA(18 mg/mL)产量均在12天达峰。Lp的香草醛产量在9天时达16 mg/mL,而Psf的VA产量在9天时为13 mg/mL。

  2. 酶结构-功能关系:LaFAE具有最紧凑的lid domain结构,这与18%的产量提升显著相关。结构比对显示,PsfFAE的催化口袋更开放,可能导致底物逃逸。

  3. 底物降解动态:所有菌株均能有效降解甘蔗渣多糖,其中La对纤维素降解率较对照提升42%。

【结论】

该研究首次证实FAE酶lid domain的结构完整性直接影响酚类化合物转化效率,为理性选择工业菌株提供了理论依据。La因其高效的FAE酶系统和益生特性,成为甘蔗渣生物转化的优选菌株。研究成果不仅为农业废弃物高值化利用开辟了新途径,其提出的"酶结构域-产量"关联模型更为微生物催化剂设计提供了新思路。

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