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RNA干扰靶向MIPS1基因降低扁豆植酸含量的生物强化研究
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年07月16日 来源:Biocatalysis and Agricultural Biotechnology 3.4
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针对扁豆中植酸(phytic acid)影响矿物质吸收的问题,研究人员通过RNA干扰技术靶向沉默MIPS1基因,成功培育出植酸含量降低86.25%的转基因品系,为开发营养强化作物提供了新策略。该成果发表于《Biocatalysis and Agricultural Biotechnology》。
植酸(phytic acid)作为豆科作物中主要的抗营养因子,会与铁、锌等矿物质形成不溶性复合物,严重影响人类和牲畜的营养吸收。尽管肠道微生物能部分降解植酸产生有益代谢物,但高植酸饮食仍会导致矿物质缺乏症。扁豆(Lablab purpureus)作为耐旱性强但开发不足的作物,其成熟豆荚植酸含量高达410.88 mg/100 g,亟需通过生物技术改良。
印度农业研究委员会资助的喀拉拉农业大学(Kerala Agricultural University)研究人员Feba Jacob团队,在《Biocatalysis and Agricultural Biotechnology》发表重要研究。他们选择肌醇-1-磷酸合成酶基因(Myo-inositol 1-phosphate synthase, MIPS1)作为靶点——该基因编码的酶催化植酸合成第一步反应,通过RNA干扰(RNAi)技术成功培育出低植酸转基因扁豆品系。
研究采用四项关键技术:1)基于ORFfinder和RNAi设计工具筛选MIPS1基因最佳干扰靶点;2)构建含正反义片段的重组pRNAi-LIC载体;3)通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的in planta转化获得6个转基因株系;4)采用茎环逆转录PCR(stem-loop RT-PCR)验证siRNA合成效率。
转基因株系中MIPS1表达量降至野生型的0.03-0.75倍,证实RNAi有效抑制目标基因表达。
成熟豆荚植酸含量从野生型410.88 mg/100 g显著降至56.47-278.53 mg/100 g,最高降幅达86.25%。
所有转基因株系在发芽率、生长发育等指标上与野生型无显著差异,证明适度降低MIPS1表达不影响正常生理功能。
这项研究首次在扁豆中实现RNAi介导的基因沉默,创新性地证明仅需抑制单个MIPS基因即可大幅降低植酸含量。研究团队特别指出,完全敲除MIPS1会破坏细胞必需的肌醇代谢,而本方案通过精准调控使植酸降低至营养安全水平(>50%),同时保留足量肌醇用于合成抗坏血酸、磷脂酰肌醇等关键代谢物。该成果为其他豆科作物的营养强化提供了重要范式,未来需进一步探索植酸含量的最低安全阈值及多基因协同调控策略。
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